Судебно-медицинская экспертиза следов спермы.

Пятнаспермы (мужскойсеменнойжидкости) являютсяобычнообъектомсудебно-биологическойэкспертизыприрасследованииполовыхпреступлений (изнасилования, развратныхдействий).

Этапы: выявлениеследовспермынаместепроисшествия, ихизъятие, упаковкаи

направлениевсудебно-биологическуюлабораторию; непосредственноеисследованиевсудебно-биологическойлабораториииоформлениесоответствующейдокументациипорезультатамисследования.

Объектыисследования: одеждаителапотерпевшихиобвиняемых, мазкиитампоны, окружающиепредметысместапроисшествия. Мазкидолжныбытьвзятыкакможноскорее, таккакспермасохраняетсявовлагалище, какправило, недолго (неболее 72 ч).

Присудебно-медицинскомисследованииспермыэкспертунеобходимодатьответынаследующиевопросы:

1. Имеетсялисперманапредставленныхдляисследованияобъектах?

2. Каковагрупповаяпринадлежностьспермы?

3. Моглалиспермапринадлежатьданномуконкретномулицу?

Выявлениеследовспермы

Всеметодикивыявленияспермыподразделяютсянапредварительные(ориентировочные)идоказательные.

Предварительные методы

• визуальныйосмотр,

• осмотрвультрафиолетовыхлучах,

• микрокристаллическаяреакция (пробаФлоранса) - неимеетпрактическойзначимостиипредставляетлишьисторическийинтерес.

• реакцияскартофельнымсоком,

• реакциянакислуюпредстательнуюфосфатазу

• пробаспикриновойкислотой

Визуальный осмотр.Внормесвежаяспермаимеетвидгустой, слизеобразной, белесоватой, слегкаопалесцирующейнепрозрачнойжидкости, имеющейслабощелочнуюреакциюизапахзеленогокаштана. Улицвпожиломвозрастеспермаимеетжелтовато-серуюокраску. Высохшиепятнаспермыобычноболееплотныенаощупь, чемокружающиеучасткиткани, иимеютнередкоизвилистыеочертаниякраев.

Внешнийвидпятенспермыможетбытьразличнымвзависимостиоттемпературыокружающейсреды, влажности, степениинсоляции, характераследонесущейповерхности.

Вчастности, навпитывающейсветлойхлопчатобумажнойилильнянойтканиследыспермыимеютсеровато-желтоватыйцвет, крахмальнуюплотность, неровные, фестончатыекрая. Натемноокрашенныхтканяхпятнаспермывыглядяткакбелесоватыеучасткисмелкими, плохоразличимымичешуйкаминаповерхности.

Еслипосвоейприродеповерхностьпредмета-носителянеспособна впитыватьжидкость, топятнаспермыимеютнанейвиднескольковозвышающихсяжелтовато-белесоватыхкорочек, иногдасблестящейповерхностью.

Кровь, смешиваясьссеменнойжидкостью, можетпрактическиполностьюмаскироватьследыспермы.

Осмотр в ультрафиолетовых лучах. Применяетсяпринеобнаруженииспермывовремяпервичногоосмотра. Сэтойцельюобычноиспользуюткварцевуюлампу. Свежиепятнаспермы, образовавшиесясразупослеэякуляции, даютжелтовато-зеленоватоесвечениезасчетналичиявнихфлавинаифлавиноидов. Пятнамспермысуточнойдавностисвойственнаголубоватобелаялюминесценция. Степеньлюминесценцииуменьшаетсяпомерестарениясперменныхпятен.

Флюоресценцию, свойственнуюсперме, могутдаватьидругиевещества (крахмал, слюна, выделенияизвлагалища, синтетическиеткани). Иногдазаведомыепятнаспермыутрачиваютспособностьфлюоресцироватьиз-засмешиванияскровью, действиякрасителей, щелочей, кислотидр. Участкиткани, дающиехарактерноесвечениеилиподозрительныенаналичиеспермы, обшиваютниткамиилипомечаютбулавками.

Нередкоследыспермымогутбытьуничтоженыпутемзастирыванияилизамывания. Втакихслучаяхихневозможнообнаружитьдажеспомощьюультрафиолетовогооблучения. Темнеменее, специальноеисследованиепозволяетвыявитьспермунатканидажепослечисткиилистиркиеё. Поэтомуодеждапотерпевшейивсепредметы, накоторыхспермавизуальнонеопределяется, номожеттамнаходиться, исходяизобстоятельствпроисшествия, всегдадолжнынаправлятьсянадальнейшуюэкспертизу.

Реакция с картофельным соком.Сущностьреакциискартофельнымсокомосновананаспособностивходящейвеесоставаскорбиновойкислотыагглютинироватьэритроцитыкровинезависимоотихантигеннойпринадлежности. Наиболеевыраженнаяреакциянаблюдаетсясэритроцитами I группы. Вприсутствииспермытестостерон, содержащийсявспермоплазме, активноблокируетагглютинирующеедействиевитаминаСиагглютинациянепроисходитилирезкотормозится, всвязисчемданнаяреакциятакженазываетсяреакциейзадержкиагглютинации.

Дляисследованияиспользуютсясокклубнейкартофеля, произрастающеговсеверныхрегионах, таккаконсодержитбольшееколичествовитаминаС, являющегосядействующимначаломвданнойреакции.

ДляпроведенияреакциивытяжкуизпятнаспермысмешиваютсотмытымиэритроцитамиІгруппыикартофельнымсоком. Параллельноставитсяконтрольнаяреакциякартофельногосокастемижеэритроцитами, нобезучастияспермальнойвытяжки. Результатыреакцииоцениваютсявизуально, спомощьюлупыимикроскопически. Отмечаютналичиеилиотсутствиеагглютинациивопытнойпробеиееналичиевконтроле.

Необходимоотметить, чтозадержкуагглютинациивреакциискартофельнымсокомможетдаватьменструальнаякровь, женскоемолоко.

Однакоследымолокаоченьлегкоотличитьотследовспермыпоналичиюжира, длявыявлениякоторогоиспользуютокраскусуданом III. Каплижираприэтомимеюткрасновато-оранжевыйцвет.

Использованиевкачествереагентавреакциизадержкиагглютинациисоковилиэкстрактовдругихрастений (шиповника, лука), атакжехимическичистойаскорбиновойкислотыограничено, ввидуихкислойреакцииинеобходимостивнесенияврастворнейтрализующихбуферов.

Картофельныйсокизначальноимеетнейтральнуюреакцию, поэтомуиспользуетсябездобавлениябуфернойсмеси.

Реакция на кислую фосфатазу. Количественноесодержаниеиактивностьэтогоферментавсеменнойжидкостизначительнобольше, чемвдругихвыделенияхчеловеческогоорганизма. Используяспециальныехимическиереактивыколориметрическимметодомопределяютприсутствиеиактивностькислойфосфатазывисследуемыхпятнах. Однакоданнуюпробунеследуетсчитатьспецифичной, ввидутого, чтомногиерастительныеэкстрактыобладаютвысокимуровнемактивностикислойфосфатазы, вместестемпомерестаренияпятенспермы, активностьферментавнихснижается.

Проба с пикриновой кислотой. Привзаимодействиирастворапикриновойкислотысоспермойобразуютсяопределяемыемикроскопическиигловидныеилиэллипсовидныекристаллыжелтоватогоцвета.

Доказательные методы

Микроскопический метод.Примикроскопическомисследованиинормальнойспермыобычнообнаруживаютсперматозоиды, мелкозернистыеклеткияичек, клеткиплоскогоицилиндрическогоэпителия, тоилииноеколичестволейкоцитовииногдаэритроциты, сильнопреломляющиесветлецитиновыезерна, простатическиезерна, амилоидныетельца.

Морфологическиеметодикивыявлениясперматозоидовподразделяютсянадвегруппы:

1. Методыизбирательнойокраскисперматозоидовнепосредственнонапредмете-носителе.

2. Методыокраскисперматозоидовпослеизвлеченияизпятна.

Дляокраскисперматозоидовнепосредственнонапредмете-носителевнастоящеевремяпреимущественноиспользуютсяпробаКорен-СтокисаипробаБаэкки.

Проба Корен-Стокиса. Дляизбирательнойокраскисперматозоидоввисследуемомпятнеприменяется 0,5 % растворэритрозинав 25 % раствореаммиака. Полученныепрепаратыисследуютприпомощисветовогомикроскопа. Доказательствомналичияспермыявляетсяобнаружениецелыхсперматозоидов (хотябыодного), вкоторыхчеткоразличимыголовка, шейка, хвостилиегофрагмент.

Проба Баэкки.Предполагаетиспользованиедляокраскисмесидвухрастворов, одинизкоторыхсодержитметиленовыйсиний, другой – кислыйфуксин. Приэтомголовкиспермиевокрашиваютсявкрасно-розовыйцвет, ахвостыприобретаютсинююокраску.

Втораягруппаметодовпредполагает предварительноеизвлечение сперматозоидовизпятна.

Экстракциюпроизводят 10 % растворомаммиакасдлительностьюэкспозиции 24-48 часов. Полученнуювытяжкуцентрифугируютивдальнейшемготовятмазкинапредметныхстеклахизнадосадочнойжидкостиицентрифугатаспоследующейихокраской 0,5 % растворомэритрозина.

Нередкоприисследованиитампоновимазковссодержимымвлагалищасперматозоидынеобнаруживаются. Этообъясняетсяагрессивнымвлияниемвлагалищноймикрофлоры, котораяспособначастичноилиполностьюлизироватьсперматозоиды.

Метод микрофлюоресценции. Сущностьегоосновываетсянаспособностисперматозоидов, обработанныхразличнымифлюорохромами, даватьхарактерноесвечение. Исследованиепроизводитсяспомощьюлюминесцентноймикроскопии. Взависимостиотиспользуемогофлюорохромасперматозоидыбудутиметьсоответствующуюокраску. Приобработкеакридином – розовую, берберинсульфатом – желтую, прииспользованииродамина – головкиспермиевокрашиваютсявзеленыйцвет, хвосты – вкрасновато-коричневый.

Крометого, существуютметодыопределениясперменногопроисхожденияпятенприотсутствиисперматозоидовилиихневыявленииспомощьюстандартныхметодик.

ТакэлектрофоретическимпутембылоустановленоналичиевследахспермыспецифичногоизоферментаЛДГ-Х, обладающегополовойивозрастнойспецифичностью. Этотферментсодержитсявосновномвсперматозоидахивсеменнуюплазмупопадаетлибопутемдиффузии, иливследствиеихфизиологическойдеструкции. Онневстречаетсяввыделенияхженскогоорганизма, умужчин, страдающихазооспермией, атакжевспермеподростковипожилыхмужчин. Какпоказалиисследования, достовернаядиагностиканаличияспермыпоизоферментуЛДГ-Хвозможналишьвтечениемесяцасмоментаобразованияследавкомнатныхусловиях. Впятнахспермы, содержащихпримесьвлагалищногосодержимого, отмечаетсяболеевыраженныйспектризоферментаЛДГ-5.

Реакция преципитации с применением антиспермальных сывороток выявляетспецифическиедляспермыбелки: простатическийв-геобулиниγсеминопротеин, вырабатываемыепредстательнойжелезой. Этотметодпозволяетдиагностироватьспермувпятнахдавностьюдо 12 лет.

Используетсятакжехроматографический метод обнаружения белков спермы – холинаиспермина.

Применениевышеуказанныхметодикстановитсянаиболееактуальнымвслучаяхазооспермии, олиго- илинекроспермии, когдаобнаружениесперматозоидовспомощьюсветовогомикроскопаоченьзатруднено.

Следуетотметить, чтоположительныйрезультатлюбогоиздостоверныхметодовдаетправонавыводоприсутствииспермы. Отрицательныйрезультатпозволяетутверждатьлишьфактнеобнаруженияспермы, анееёотсутствия.

3. 2. Видовоепроисхождениеспермы

Овидовомпроисхожденииспермыможносудитьпоморфологической структуресперматозоидов. Всомнительныхслучаяхможноприбегнутьк классическойреакциикольцепреципитациисвидоспецифическимисывороткамиилиреакциииммуноэлектрофореза.