Диагностика нарушений фагоцитоза
Фагоцитоз –комплекс клеточных реакций, направленных на распознавание, поглощение и элиминацию из организма корпускулярных частиц размером более 0,5 мкм. Процесс фагоцитоза состоит из следующих стадий: хемотаксис, адгезия, поглощение, киллинг и переваривание объекта.
Для оценки хемотаксиса определяют рецепторы на поверхности фагоцитов к хемокинам (ИЛ8).
Для оценки адгезивных свойств определяют молекулы адгезии на поверхности фагоцитов с помощью моноклональных АТ (CD18, CD11a, CD11b, CD11c, CD62L, CD62E)методомпроточной цитометрии.
Для оценки стадии поглощениявыявляют процент нейтрофилов, способных поглощать корпускулярные антигены. В качестве объекта фагоцитоза (тест система) используют бактерии, дрожжевые грибы или синтетические частицы.Метод исследования: микроскопический.
Одним из распространенных методов оценкистадии перевариванияявляется НСТ-тест.
НСТ-тестоснован на способности частиц нитросинеготетразолия, поглощенных нейтрофилом, менять окраску под действием активных форм кислорода. Тест выявляет процент нейтрофилов с активными формами кислорода. Метод исследования: микроскопический.Норма: 4-10%. НСТ-тест повышен при острых бактериальных инфекциях.
НСТ-тест стимулированный (фагоцитарный резерв) отражает потенциальную способность нейтрофилов продуцировать активные формы кислорода в ответ на антигенное раздражение. Норма(фагоцитарный резерв) 2,4-3,5.
Снижение показателей фагоцитоза отмечаетсяпри миелолейкозе,сахарном диабете, иммуносупрессивной терапии, сепсисе,может проявляться рецидивирующими гнойно-воспалительными процессами, пиогенными инфекциями кожи.
Диагностика нарушений клеточного звена. (Фенотипирование лимфоцитов)
Согласно рекомендациям ВОЗ оценка популяционного состава лимфоцитов имеет диагностическое значение при первичных и вторичных иммунодефицитах, лимфопролиферативных заболеваниях и ВИЧ-инфекции.
Под световым микроскопом все лимфоциты выглядят одинаково, однако их можно отличить по антигенам клеточной поверхности, их обозначают CD-молекулами (СD1, СD2, СDЗ и т.д. до СD130) и выявляют с помощью моноклональных антител. Набор антигенов зависит от типа клеток и их функций. В соответствии с общепринятой в мире СD-кластерной классификацией маркером всех Т-лимфоцитов считают CD3, маркером Т-хелперов CD4, маркером Т-киллеров/цитотоксических CD8 и т.д.
Метод исследования: проточнаяцитофлуориметрия с использованием меченых флуорохромными красителямимоноклональных антител к специфическим поверхностным маркерам этих клеток и последующей автоматической регистрацией.
Т-лимфоциты (CD3). Норма – 55-80% (0,80-2,00*109/л)
УровеньCD3+повышен – начальный период острогоинфекционно-воспалительного процесса (чаще вирусной этиологии).
Уровень CD3+снижен – первичные и вторичные иммунодефициты с нарушением Т-клеточного звена иммунитета;
Активированные Т-лимфоциты (СD25, НLA-DR). Норма – 3-12%.
Активационные маркеры – CD25, НLA-DR. появляются на Т-лимфоцитах, находящихся в стадии активации и могут быть использованы для диагностики, оценки активности иммунопатологических заболеваний, мониторинга лечения.
УровеньCD3+CD25+, CD3+НLA-DR+повышен– активация иммунного ответа: острый или хронический воспалительный процесс.
Уровень CD3+CD25+, CD3+НLA-DR+ снижен –иммунодефициты с нарушением Т-клеточного звена иммунитета.
Т-хелперы (CD3CD4). Норма – 31-49% (0,60-1,60*109/л)
УровеньCD3+CD4+повышен – острый инфекционно-воспалительный процесс, обострение аллергических иаутоиммунных заболеваний.
УровеньCD3+CD4+снижен –врожденные и приобретенные иммунодефициты.
Т-цитотоксические (Т-киллеры)(CD3CD8) Норма – 12-30% (0,45-0,85*109/л)
УровеньCD3+CD8+повышен – инфекции, вызванные внутриклеточными паразитами(вирусы, бактерии, грибы, простейшие).
УровеньCD3+CD8+снижен – первичные и вторичные иммунодефициты, прогрессирующие злокачественные новообразования, длительное лечение цитостатиками, гомонами, иммунодепрессантами.
Иммунорегуляторный индекс
При некоторых заболеваниях диагностическое и прогностическое значение имеет соотношение CD4/CD8 или иммунологический индекс (ИРИ). Норма: 1,2-2,5.
CD4/CD8 (ИРИ) повышен –аутоиммунные заболевания, острый Т-лимфобластный лейкоз, тимома.
CD4/CD8 (ИРИ) снижен – вирусные инфекции, хронические заболевания, опухоли. Величина ИРИ менее 1 косвенно соответствует иммунодефициту.