Работа № 3. Экспресс-диагностика сифилиса

Методические указания

При массовом обследовании населения используют экспресс-метод обследования на сифилис. Этот метод дает значимый процент ошибки, поэтому все положительные результаты подтверждаются другими серологическими реакциями (р. Вассермана, осадочные реакции).

Цель: изучить экспресс-метод обследования на сифилис

Самостоятельная работа: поставить и учесть результат экспресс-метода серологического обследования на сифилис.

Сыворотки обследуемых
Ингредиенты
1 . Инактивированная сыворотка больного	З к	З к	З к	З к	З к
2. Эмульсия кардиолипинового антигена	1 к	1 к	1 к	1 к	1 к
Ингредиенты перемешать (или встряхнуть, если реакция в планшете)
3. Физиологический раствор	1 к	1 к	1 к	1 к	1 к
После выпадения хлопьев, учесть результат

Примечание: для демонстрации дается эталон учета результатов.

Положительная реакция (крупные хлопья)	Слабоположительная (хлопья средней величины и мелкие)	Отрицательная (нет хлопьев)
++++ +++	++ +	-

______________________________________________________________________________

Работа № 4.Серологическая диагностика сифилиса

Цель: изучить современные серологические методы диагностики спирохетозов

Методические указания

а) Реакция Вассермана.Реакцию ставят по принципу реакции связывания комплемента. Отличием является то, что при постановке реакции Вассермана может быть использован неспецифический антиген - липидная вытяжка бычьего сердца. Возможность использования такого антигена объясняется тем, что в сыворотке крови больного повышается содержание глобулинов и изменяется степень их дисперсности. Глобулины, вступая в соединение с липидньми экстрактами, образуют комплекс, который связывает комплемент, и поэтому гемолиз не происходит (в гемолитической системе). Отсутствие гемолиза - положительная реакция - серологически подтверждает диагноз "сифилис". При постановке серологических реакций можно использовать специфические антигены из тканевых трепонем и культуральные.

Самостоятельная работа:учесть результат готовой реакции Вассермана, поставленной с целью выявления антител в сыворотке крови больного с подозрением на сифилис. Сделать вывод.

Направление:___________________________________________________________________

Ингредиенты:____________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________

______________________________________________________________________________

Механизм:

Постановка:

Аг1 Аг2 Аг3 КС КА КГС

Результат:____________________________________________________________________________________________________________________________________________________

____________________________________________________________________________________________________________________________________________________________

б) Реакция иммобилизации спирохет

Методические указания

К тканевым живым трепонемам прибавляют исследуемую сыворотку больного с подозрением на сифилис. Через несколько минут трепонемы теряют способность двигаться. Методика постановки реакции: все пробирки выдерживают в анаэростате при 35⁰С 20 часов, готовят препарат "раздавленная капля" и микроскопируют в темном поле зрения. Процент иммобилизованных трепонем определяют по формуле:

х= Тк - То х 100, где

Т_к

Тк - число подвижных трепонем в контроле (с инактивированным комплементом)

То - число подвижных трепонем в опыте

Учесть результат опыта при: Тк=30, То=12

Результат: положительный - процент иммобилизации выше 50, отрицательный - ниже 20, слабо положительный, сомнительный - 30-50, 20-30.

Самостоятельная работа: учесть результат реакции иммобилизации трепонем (РИТ) с целью выявления специфических антител в сыворотке крови больного сифилисом. Сделать вывод.

Ингредиенты	Пробирки
	"К"	"К"	"О"
Сыворотка здорового	+	-	-
Сыворотка больного	-	+	+
Физ. р-р	+	-	-
Комплемент инактивированный	-	+	-
Комплемент	-	-	+
Живые тканевые трепонемы	+	+	+

_______________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________

Работа № 6. Принципиальная схема лабораторной диагностики сифилиса

Самостоятельная работа:разобрать особенности лабораторной диагностикисифилиса. Отметить наиболее информативные методы лабораторной диагностики.

Работа № 3. Экспресс-диагностика сифилиса - student2.ru Исследуемый материал:

____________________

Работа № 7.Серологическая диагностика лептоспироза

Задача. В клинику поступил больной с лихорадочным заболеванием на 8-й день болезни. Местность, где проживал больной, неблагополучна по лептоспирозу. У больного была дважды взята кровь - в момент поступления и через неделю - и направлена на исследование для определения специфических антител с диагностикумом L. interrogans в реакции связывания комплемента.

Самостоятельная работа: учесть готовый результат РСК с парными сыворотками обследуемого с подозрением на лептоспироз. Ответить на вопросы:

1) подтвержден ли диагноз лептоспироза?

2) обосновать диагностическую значимость проведенного исследования.

1-й ряд

(8-й день

заболевания)

2-й ряд

(15-й день

заболевания)

1/1001/200 1/400 1/800 1/1600 КС КА КГС

Результат: ___________________________________________________________________

____________________________________________________________________________________________________________________________________________________________

Вывод: ______________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________

Работа № 8.Серологическая диагностика Лайм-боррелиоза

Задача. В клинику обратился пациент, который 2 недели назад снял с себя клеща. К врачу не обращался. Через неделю после присасывания клеща образовалась кожная эритема. Предварительный диагноз: «клещевой иксодовый боррелиоз». Для подтверждения диагноза была поставлена нРИФ с сывороткой обследуемого и диагностикумом

из боррелий (B.burgdorferi).

Самостоятельная работа: разобрать принцип постановки нРИФ и учесть результат реакции на обнаружение антител в сыворотке пациента с подозрением на Лайм-боррелиоз. Сделать вывод.

Механизм:

Результат: _____________________________________________________________________

______________________________________________________________________________

Вывод: _______________________________________________________________________

______________________________________________________________________________

Подпись преподавателя ________________________________________________________

Самостоятельная работа студента во внеурочное время:

1.Классифицировать предложенные антимикробные препараты в соответствии с их назначением (профилактические, диагностические, лечебные).

1.Вакцина лептоспирозная инактивированная жидкая

2._____________________________________________________________________________

3._____________________________________________________________________________

4._____________________________________________________________________________