Методы токсикологического анализа

Химические методы. В ветеринарной токсикологии химическими методами пользуются для определения токсических металлов и их соединении (ртуть, свинец, цинк, барий, медь,мышьяк), растительных алколойдов (анабазин, ареколин, никотин, атропин, скополамин, папаверин, стрихнин, вератрин и др) синильной кислоты и ее солей, нитритов, нитратов, хлористого натрия, фосфида цинка, соединений фтора, хлорорганических и фосфорорганических соединений и др. химических веществ. Обычно применяют колорометрию, титрометрию, реакции осаждения.

Колориметрия. Колорометрия основана на том, что молекулы ядохимикатов или отдельные атомы, вступая в реакцию с др. соединениями ,образуют цветные комплексы, интенсивность окраски к-рых зависит от кол-ва яда, содержащегося в исследуемом субстрате. Титрометрия прим-ся сравнительно редко. Ее в основном используют для определения хлористого натрия. Метод основан на титровании иона хлора р-ром нитрата серебра в присутствии хромата калия в качестве индикатора.

Реакция осаждения (для определения) алколойдов) основаны на том, что алколойды дают с танином, хлоридом ртути, фосфорно –вольфрамовой, фосфорно –молибденовой или пикриновой кислотами нерастворимые в воде соединения, выпадающие в осадок.

Методы токсикологического анализа (продолжение)

Биохимический метод. Обычно применяют в случае отравления животных фосфорорганическими или карбаматными инсектицидами. Экстракт из патологического материала инкубируют с холинэстеразой, используя в качестве субстрата ацетилхолин. По скорости гидролиза ацетилхолина определяют активность фермента, которая зависит от наличия ингибитора холинэстеразы. Специфической способностью ингибировать этот фермент обладают фосфорорганические и карбаматные инсектициды.

Биологические методы. Для обнаружения пестицидов используют простейших ракообразных (дафний) или же членистоногих (мух дрозофил, комнатных мух, личинок комаров и др.). Токсические вещества извлекают из биологического субстрата органическим растворителем, а затем действуют им на членистоногих. По степени гибели этих организмов судят о наличии токсического начала.

Химические методы. Чаще всего применяют для посмертного токсикологического анализа. В ветеринарной токсикологии химическими методами пользуются для определения токсичных металлов и их соединений (ртуть, свинец, цинк, барий, медь, мышьяк), растительных алкалойдов 9анабазин, ареколин, никотин, атропин, скополамин, папаверин, стрихнин, вератрин и др.), синильной кислоты и ее солей, нитритов, нитратов, хлористого натрия, фосфида цинка, соединений фтора, хлорорганических и фосфорорганических соединений и др. химических веществ.

Обычно применяют колорометрию, титрометрию, реакции осаждения.

Физико –химические методы – наиболее современные методы токсикологического анализа. Из них в ветеринарной практике применяютпреимущественно тонкослойную и газовую хроматографии.

Тонкослойная хроматография может быть использована для определения фосфорорганических и хлорорганических соединений, органических соединений ртути, гербицидов группы 2,4-Д и др. пестицидов, а также некоторых растительных алколойдов и микотоксинов.

Газовая хроматография – наиболее совершенный физико –химический метод токсикологического анализа. Используется для определения хлорорганических и фосфорорганических инсектицидов.

Определение нитритов, нитратов, хлористого натрия, мечевины, хлорорганических и фосфорорганических пестицидов

Исследуемый материал измельчают, смешивают с небольшими объемами дистилированной воды, фильтрируют и исследуют фильтрат.

Проба с дефениламином. К водному экстракту пробы добавляют 2-3 капли р-ра дефениламина в серной кислоте. При наличии нитритов и нитратов экстракт окрашивается в синий цвет.

Метод Мора применяют для определения хлорида натрия. Основан на титровании иона хлора р-ром нитрата серебра в присутствии хромата калия (индикатор). При отравлениях в колбе Кьельдаля аммиак поглащают 0,1 н. р-ром Н2SO4. избыток к-ты титруют 0,1 н. р-ром едкого натра.

Определение хлорорганических и фосфорорганических пестицидов в патологическом материале. Пестициды экстрагируют смешиванием субстрата с органическим растворителем или интенсивным смешиванием в блендоре или с применением ультраторакса. Экстракты очищают дистиллированной перегонкой, распределением в двух или более жидких системах. Иденфицируют пестициды обычно тонкослойной или газо – жидкостной хроматографей.

Определение алколойдов, мышьяка и солей тяжелых металлов

Определение алколойдов.Алколойды в воде не растворяются. При взаимодействии с кислотами они образуют водорастворимые соли. На этом основании патматериал экстрагирует подкисленной водой. Затем алколойды перекстрагируют в хлороформ. Хлороформ отгоняют, осадок растворяют в 1%-ном водном р-ре соляной кислоты и определяют алколойды с помощью реакции осаждения с фосфорно –вольфрамовой, фосфорно –молибденовой или пикриновой кислотами, а также танином. Пользуются и реакцией осаждения алколойдов в иодиде калия одним из следующих веществ: р-р иода, иодит ртути, иодит висмута. Применяют также реакцию окращиванияс серной и азотной кислотами и метод тонкослойной хроматографии.

Судебная ветеринария