Культуральные свойства
- Факультативные анаэробы, прихотливы к питательным средам. Нуждаются в наличии факторов роста в среде. Этими факторами являются факторы Х или V, которые содержатся в эритроцитах: V – термолабильный кофермент, он является составной частью витамина В; фактор Х – термостабильный, содержится в эритроцитах.
- Лучшими средами являются кровяной и шоколадный агар. Непатогенные, бескапсульные штаммы образуют R-формы колоний.
- На кровяном агаре с добавлением сердечно-мозгового экстракта через 24 часа появляется рост мелких колоний с радужными переливами, гемолиз отсутствует. У беcкапсульных вариантов радужная расцветка не выявляется.
- На жидких средах с кровью рост чаще диффузный, реже – придонный.
Биохимические свойства.
H.influenzae:
- каталаз+,
- оксидаза+,
- разлагает глюкозу,
- нуждается в X-, V-факторах.
Антигены.
О – соматический (ЛПС)
К – капсульный полисахаридный антиген; по К-антигену выделяют в реакции агглютинации, ИФА, реакции преципитации с монорецепторными сыворотками 6 серовариантов (a, b, c, d, e, f).
Белковый антиген М имеется у непатогенных штаммов.
Факторы патогенности: капсулы, пили, IgА-протеазы, липополисахаридные, гликопротеиновые факторы и эндотоксин.
Резистентность.Во внешней среде малоустойчивы к физическим и химическим факторам. Выделение из патологического материала возможно не позднее 1-4 часов после его сбора.
Характеристика заболевания
Источник инфекции – больной человек и носители, в носоглотке которых локализуется возбудитель. Путь передачи – воздушно-капельный, в меньшей степени контактный.
Патогенез связан с состоянием иммунной системы организма. Возбудители, особенно H.influenzae, могут быть в слизи носоглотки здоровых людей, но на фоне других заболеваний H.influenzae размножается на слизистых оболочках внутри- и внеклеточно, проникает в кровь, а через гематоэнцефалический барьер в мозговые оболочки, что приводит к менингиту.
Иммунитет:
• После заболевания гуморальный, стойкий; естественный пассивный иммунитет от матери сохраняется 3-6 месяцев.
• У детей до трех месяцев материнские антитела, и они обычно не болеют.
• У взрослых людей обнаруживаются антитела к капсульным антигенам, что указывает на развитие приобретенного гуморального иммунитета.
Профилактика специфическая. Вводят химическую вакцину из капсульных антигенов H.influenzae по эпидемиологическим показаниям. Вакцина HiB.
Лечение. Применяют антибиотики с учетом чувствительности. Чаще используют ампициллин, рифампицин, эритромицин.
Лабораторная диагностика:
Материал зависит от формы заболевания, чаще исследуют спинномозговую жидкость, мокроту, кровь или мочу.
Бактериоскопический метод носит ориентировочный характер.
Бактериологический метод. Делают посев на среды с кровью. Идентификацию проводят по культуральным, биохимическим и антигенным свойствам с использованием специфических монорецепторных сывороток.
Серологический метод. Для выявления антигенов в исследуемом материале используют РИФ, ИФА, РПГА с антительным диагностикумом, ВИЭФ. Параллельно проверяют потребность в X и V-факторах. Исследуемую культуру сеют сплошным газоном на плотную питательную среду. На посев накладывают два бумажных диска, смоченных, соответственно X и V-факторами. Если рост выявляется вокруг дисков, то подтверждают зависимость культуры от этих факторов.
Можно использовать тест сателлитных культур. На чашку с посевом культуры на кровяном агаре наносят в нескольких местах культуру S.aureus, за счет выделяемого ими гемолизина вокруг колоний стафилококка наблюдается обильный рост исследуемой культуры.
Легионеллы
Легионеллы – возбудители тяжелых пневмоний, реже они вызывают перитониты и поражения нервной системы.
Морфология.
- мелкие, полиморфные грамотрицательные палочки с заостренными концами,
- иногда встречаются нитевидные формы.
- спор и капсул нет,
- имеют жгутики, которые располагаются полярно (амфитрихи),
- в цитоплазме обнаруживают липидные включения.
Культуральные свойства.
- Аэробы, хорошо растут в присутствии 5% СО2 на специальных средах (угольно-дрожжевой агар, среды с цистином, кровью, железом),
- На 3-5 день появляются колонии с коричневым пигментом, диффундирующим в агар.
- Факультативные внутриклеточные паразиты, хорошо размножаются в желточном мешке куриного эмбриона и культуре клеток.
- Некоторые легионеллы обладают аутофлюоресценцией (облучение УФИ вызывает бело-голубое свечение).
Биохимические свойства:
- малоактивны,
- разжижают желатин,
- разлагают крахмал,
- не ферментируют углеводы,
- каталаза+,
- оксидаза+,
Антигены. Имеют видоспецифический О-антиген, по которому в реакции иммунной флюоресценции установлено 12 серогрупп. L.рneumophila относится к I серогруппе. Н-антиген не имеет диагностического значения. Есть общие антигены с Chlamydia psittaci.
Факторы патогенности.
- Эндотоксин и экзотоксиноподобные субстанции обладают цитотоксическим, гемолитическим, некротическим действием, оказывают избирательный тропизм на легочную ткань при размножении легионелл в альвеолярных макрофагах и моноцитах.
- У L. pneumophilia имеется два низкомолекулярных токсина: цитотоксин, влияющий на кислородный метаболизм полиморфно-ядерных лейкоцитов, и токсин, ингибирующий «дыхательный взрыв» в фагоцитах.
- Секреторный белок цитолизин (Zn-металлопротеаза) обладает протеолитической и токсической активностью, нарушает фагоцитоз.
- Фосфолипаза гидролизует фосфатидилхолин и ингибирует бактерицидные функции нейтрофилов.
- Zn-протеинкиназа и кислая фосфатаза фосфорилируют субстраты в клетках.
Резистентность.Устойчивы в окружающей среде. Вода рассматривается как экологическая ниша легионелл. Чувствительны к дезинфектантам.