Применение жидкостно-жидкостного микроэкстракционного концентрирования с диспергированием экстрагента для определения микотоксинов нт-2 и т-2 в зерне и кормах
Карасева Н.М.
Федеральный центр охраны здоровья животных,
Владимир, Россия.
Аспирант 1г.
Научный руководитель: Амелин В.Г.
Микотоксины – токсичные вещества, выделяемые микроскопическими плесневелыми грибами. При благоприятных условиях для роста грибов (определенная влажность, температура) микотоксины интенсивно развиваются и способны загрязнять сырье растительного происхождения и различные продукты питания. Эти соединения обладают достаточно высокой молекулярной массой и характеризуются сложной органической матрицей. Анализ таких веществ является достаточно сложной и трудоемкой задачей.
Одними из наиболее опасных и часто встречаемых токсинов являются трихотеценовые микотоксины. Данные соединения разделяют на 4 группы (А, B, C, D), в зависимости от строения и свойств. Наиболее широко трихотеценовые микотоксины распространены в северных регионах с умеренным климатом. Обычно они встречаются в зерновых культурах (пшеница, рожь, ячмень, овес и кукуруза).
В данной работе показана возможность определения трихотеценовых микотоксинов НТ-2 и Т-2 (рис. 1.) в зерне и кормах с применением дисперсионной жидкостно-жидкостной микроэкстракции их из экстрактов, полученных по методу QuEChERS. Разработана быстрая и простая методика одновременного определения токсина Т-2, НТ-2 в зерне и комбикормах в диапазоне концентраций 0,03-3 мг/кг методом газожидкостной хроматографии с детектором по захвату электронов. Микотоксины из образцов экстрагировали ацетонитрилом, экстракты очищали по методу QuEChERS. Производные целевых компонентов с трифторуксусным ангидридом получали одновременно с дополнительной очисткой и концентрированием экстракта дисперсионной жидкостно-жидкостной микроэкстракцией (ДЖЖМЭ). Продолжительность анализа составляет 1 ч, относительное стандартное отклонение результатов анализа не превышает 0,08.
Совместное применение метода QuEChERS и микроэкстракции позволило дополнительно очисть экстракт и повысить эффективность определения микотоксинов, а также способствовало упрощению и сокращению времени приготовления образцов по сравнению с традиционными методами пробоподготовки (рис. 2. ).
Рис. 1. Структурная формула трихотеценовых микотоксинов типа А: токсин T-2 - R1=OH, R2=R3=OСОCH3, R4=H, R5=OCOCH2CH(CH3)2, токсин HT-2 - R1=R2=OH, R3=OСОCH3, R4=H, R5=OCOCH2CH(CH3)2
Рис. 2. Хроматограммы экстракта комбикорма, полученные при использовании метода QuEChERS и упаривание экстракта (а) и метода QuEChERS в сочетании с ДЖЖМЭ и дериватизации (б) : 1 - НТ-2; 2 - Т-2