Таксономия микроорганизмов

Вид- _________________________________________________________________

__________________

Чистая культура -___________________________________________________ ______________________________________________________________________

Штамм - __________________________________________________________

______________________________________________________________________

Клон - ____________________________________________________________

______________________________________________________________________

Биовар - __________________________________________________________

______________________________________________________________________

ОСНОВНЫЕ ТАКСОНОМИЧЕСКИЕ ГРУППЫ МИКРООРГАНИЗМОВ, ИМЕЮЩИХ МЕДИЦИНСКОЕ ЗНАЧЕНИЕ

Определение Пример
Царство ЭУКАРИОТА
Простейшие -  
Грибы -  
Царство ПРОКАРИОТА
Бактерии -  
Микоплазмы -  
Риккетсии -  
Хламидии-  
Спирохеты -  
Царство ВИРА

Занятие № 2 Дата______________

Тема: МОРФОЛОГИЯ БАКТЕРИЙ. КАПСУЛЫ И СПОРЫ БАКТЕРИЙ, МЕТОДЫ ИХ ИЗУЧЕНИЯ. СЛОЖНЫЕ СПОСОБЫ ОКРАСКИ БАКТЕРИЙ. ОКРАСКА ПО ГРАМУ, ОКРАСКА КИСЛОТОУСТОЙЧИВЫХ БАКТЕРИЙ.НЕГАТИВНЫЕ СПОСОБЫ ОКРАСКИ. ЯДЕРНАЯ СУБСТАНЦИЯ. СПОРЫ. ОКРАСКА СПОР.ОКРАСКА ЖГУТИКОВ.

Цель: Научиться окрашивать фиксированный препарат по Граму и изучать мор­фологические и тинкториальные свойства микроорганизмов. Изучить строение бактериальной клетки, функции и методы выявления отдельных органоидов.

Основные вопросы, разбираемые на занятии:

1. Отличия клеток прокариотов от эукариотов.

2. Облигатные компоненты клеток прокариотов.

3. Факультативные компоненты клеток прокариотов.

4. Выявление различий в строении клеточной стенки бактерий с помощью окраски по Граму.

5. Особенности сложных методов окраски – по Цилю-Нильсену, по Бурри-Гинсу, по Ожешке, по Нейссеру.

6. Бактериоскопический метод диагностики, его достоинства и недостатки.

СТРУКТУРА БАКТЕРИАЛЬНОЙ КЛЕТКИ

Органоид Функция Метод выявления
Облигатные органоиды
Клеточная стенка    
Цитоплазматиче-ская мембрана    
Нуклеоид    
Рибосомы    
Мезосомы    
Факультативные органоиды
Пили      
Жгутики    
Капсула    
Спора    
Плазм иды    
Включения    

ОБЩАЯ СХЕМА СЛОЖНЫХ (ДИФФЕРЕНЦИАЛЬНЫХ) МЕТОДОВ ОКРАСКИ:

• основной краситель;

• дифференцирующее вещество;

• дополнительный краситель.

СЛОЖНЫЕ МЕТОДЫ ОКРАСКИ

ОКРАСКА ПО ГРАМУ

Схема метода:

Этап Вещество Время обработки
Основной краситель Генцианвиолет (кристаллвиолет) 1мин
Фиксатор Р-р Люголя 1 мин
Дифференцирующее ве­щество Спирт этиловый 96° 5-10 сек
Промывка Вода 5-10 сек
Дополнительный краси­тель Водный фуксин « 1 мин
Промывка Вода 5-10 сек

Принцип метода:

Генцианвиолет связывается с пептидогликаном клеточной стенки. Толстый слой пептидогликана грамположительных бактерий связывает много красителя, тонкий слой - грамотрицательных - мало. Раствор Люголя фиксирует краситель за счет образования комплсса краситель-пептидогликан-йод. При обработке мазка спиртом грамотрицательные микроорганизмы быстро теряют краситель и обесцвечиваются, а грамположительные - остаются окрашенными в синий цвет. Дополнительный краситель окрашивает грамотрицательные микроорганизмы в красный цвет.

  бактерии
грамположительные грамотрицательные
Структура клеточной стенки 1. Пептидогликан 2. Внешняя мембрана (липополисахарид) 3. Тейхоевые кислоты    
Результат окраски по Граму (рисунок) Гр(+) бактерии     Гр(-) бактерии     Смесь Гр(+) и Гр(-) бактерий    
 

ВЫЯВЛЕНИЕ КАПСУЛ ПО БУРРИ И БУРРИ-ГИНСУ.

Схема метода:

Этап Вещество Воемя обработки
Негативное контрастирование (по Бурри) Черная тушь (смешивается с ис­следуемой культурой и высуши­вается)  
Фиксация В пламени спиртовки  
Окраска микробных клеток (по Гинсу) Водный фуксин 1 мин
Промывка Вода 5-10 с

Принцип метода:

Капсула не воспринимает красители, поэтому её выявляют, создавая в препарате черный тушевой фон (метод Бурри). Дополнительная окраска тела микробной клетки позволяет визуализировать капсулу (метод Бурри-Гинса).

Klebsiella pneumomae.

Окраска по Бурри-Гинсу. Увеличение х_

Наши рекомендации