Анализ лекарственных препаратов, производных пурина
Цель занятия:
- изучить свойства, реакции идентификации и методы количественного определения лекарственных веществ группы пурина
Задачи занятия:
- ответить на вопросы входного контроля;
- изучить свойства лекарственных веществ, группы пурина;
- выполнить исследовательскую работу по идентификации веществ группы пурина, провести фармакопейный анализ идентифицируемого вещества;
В процессе самоподготовки и на занятии студент должен приобрести следующие знания и умения:
Знать:
- реакции идентификации ЛВ группы пурина;
- реакции количественного определения ЛВ, группы пурина;
- фармакопейные методики проведения анализа препаратов группы пурина
Уметь:
- идентифицировать лекарственные вещества, группы пурина и проводить их фармакопейный анализ;
- проводить анализ ЛФ, содержащих вещества двойного и непостоянного состава;
- оформлять отчетную документацию.
Задание на занятие:
- провести общие и специфические реакции подлинности производных пурина;
- провести идентификацию предложенной субстанции и провести ее фармакопейный анализ;
- по результатам проведенных испытаний оформить отчетную документацию.
Самостоятельная работа студентов
Задание I. Провести общие и специфические реакции подлинности на производные пурина.
Общие реакции подлинности
Мурексидная проба. В фарфоровую чашку помещают 0,01-0,1 г вещества, прибавляют 5 капель разведенной хлористоводородной кислоты, 5 капель пергидроля и выпаривают на водяной бане досуха. Остаток охлаждают, смачивают 1-2 каплями раствора аммиака; наблюдают эффект реакции.
Реакция с реактивом Вагнера. 0,01 г вещества растворяют при нагревании в 0,5-1,0 мл воды, прибавляют 1-2 капли раствора йода 0,1 моль/л, 1-2 капли разведенной хлористоводородной кислоты и наблюдают эффект реакции.
Реакция с танином. 0,03 г вещества растворяют в 2 мл воды, прибавляют по каплям 0,1% раствор танина и наблюдают эффект реакции.
Реакция с кобальта хлоридом. 0,1 г вещества взбалтывают в течение 2-3 минут с мл раствора натрия гидроксида 0,1 моль/л и фильтруют. К фильтрату прибавляют 2 капли 2 капли 2% раствора кобальта хлорида и наблюдают эффект реакции.
Реакция с серебра нитратом. 0,05 г вещества растворяют в смеси 1 мл воды и 0,5 мл раствора аммиака, прибавляют 0,5 мл раствора серебра нитрата, перемешивают и наблюдают эффект реакции.
Полученные данные оформить в виде таблицы.
| Формула, русское, латинское и химическое название препарата | Отношение к реагентам | Специфические реакции | ||||
| Н2О2 (HCl) + NH4OH | J2 + KJ | танин | CoCl2 | AgNO3 | ||
Специфические реакции подлинности
Кофеин-бензоат натрия.0,01 – 0,02 г вещества растворяют в 1 мл воды, прибавляют 1-2 капли раствора хлорида окисного железа. Образуется осадок розовато-желтого цвета (обнаружение связанной бензойной кислоты).
Катион натрия доказывается микрокристаллоскопической реакцией с пикриновой кислотой.
Эуфиллин.0,02 г вещества растворяют в 10 каплях воды, прибавляют 1 каплю раствора меди (II) сульфата, появляется фиолетовое окрашивание (обнаружение этилендиамина).
Задание II. Идентифицировать и провести фармакопейный анализ неизвестного лекарственного препарата производных пурина.
Студент получая у преподавателя субстанцию, должен провести ее идентификацию и фармакопейный анализ.
Анализ субстанции кофеина
Описание. Белые шелковистые игольчатые кристаллы или белый кристаллический порошок без запаха, горьковатого вкуса.
Растворимость. Медленно растворим в воде (1:60), легко растворим в горячей воде и хлороформе, трудно растворим в спирте , очень мало растворим в эфире.
Подлинность. 0,01 г вещества помещают в фарфоровую чашку, прибавляют 10 капель разведенной соляной кислоты, 10 капель пергидроля и выпаривают на водяной бане досуха. Остаток смачивают 1-2 каплями раствора аммиака; появляется пурпурно-красное окрашивание.
0,01 г вещества растворяют в 10 мл воды. К 5 мл полученного раствора прибавляют по каплям 0,1% раствор танина; образуется белый, осадок растворимый в избытке реактива.
0,05 г вещества растворяют в 5 мл горячей воды, охлаждают, добавляют 10 капель 0,1 н. раствора йода; не должно появиться ни осадка, ни помутнения. При прибавлении нескольких капель разведенной соляной кислоты образуется бурый осадок, растворимый в избытке щелочи.
Кислотность и щелочность. 0,2 г вещества растворяют в 10 мл свежепрокипяченной воды. При добавлении к охлажденному раствору 5 капель тимолфталеина не должно появляться голубое окрашивание. Последнее должно появляться при добавлении не более 0,1 мл 0,05 н. раствора гидроксида натрия.
Посторонние алкалоиды. 10 мл раствора вещества (1:100) не должны давать помутнения от прибавления нескольких капель реактива Майера.
Органические примеси. 0,3 г вещества должны растворяться в 3 мл концентрированной серной кислоты, а так же в 3 мл концентрированной азотной кислоты с образованием прозрачных, бесцветных растворов.
Потеря в массе при высушивании. Около 0,5 г вещества (точная навеска) сушат при 800С до постоянного веса. Потеря в массе при высушивании не должна превышать 8,5% для кофеина моногидрата, и 0,5 % для безводного кофеина.
Количественное определение. Около 0,15 г вещества (точная навеска) предварительно высушенного при 800С до постоянной массы растворяют в 10 мл уксусного анагидрида при нагревании на водяной бане, прибавляют 20 мл бензола, 5 капель раствора индикатора кристаллического фиолетового и титруют 0,1 н раствором хлорной кислоты до получения желтого окрашивания. Параллельно проводят контрольный опыт.
1 мл 0,1 н раствора хлорной кислоты соответствует 0,01942 г кофеина, которого в пересчете на сухое вещество должно быть не менее 99%.
Альтернативный метод: Около 0,05 г препарата (точная навеска) помещают в мерную колбу емкостью 50 мл, растворяют в 10 мл горячей воды, охлаждают, прибавляют 5 мл разведенной серной кислоты, 25 мл 0,1 моль/л раствора йода, доводят водой до метки, перемешивают. Через 15 минут фильтруют, отбрасывая первые 5-10 мл фильтрата. 25 мл фильтрата (берут пипеткой) титруют раствором натрия тиосульфата 0,1 моль/л. Параллельно проводят контрольный опыт.
Анализ субстанции кофеин бензоата-натрия
Описание. Белый кристаллический порошок без запаха, слабо горького вкуса.
Растворимость. Легко растворим в воде, трудно растворим в спирте.
Подлинность. 0,5 г вещества растворяют в 3 мл воды, добавляя 1 мл раствора едкого натра, 10 мл хлороформа и взбалтывают в течение 1-2 минут. Хлороформный раствор фильтруют через фильтр с безводным сульфатом натрия и выпаривают хлороформ на водяной бане. Остаток дает реакции подлинности характерные для кофеина.
Раствор вещества дает реакцию на бензоаты
Кислотность и щелочность: К раствору0,25 г вещества в 5 мл свежепрокипяченной и охлажденной воды прибавляют насколько капель раствора фенолфталеина. Раствор не должен окрашиваться в розовый цвет. Розовая окраска должна появляться от прибавления не более 0,15 мл 0,05 н. раствора гидроксида натрия.
Потеря в массе при высушивании. Около 0,5 г вещества (точная навеска) сушат при 800С до постоянного веса. Потеря в массе при высушивании не должна превышать 5 %