Клинико-диагностическое значение определения сиаловых кислот

Сиаловые кислоты представляют собой N-ацетилпроизводные нейраминовой кислоты. Они находятся во всех тканях и биологических жидкостях, являются важной составной частью углеводно-белковых комплексов, в которых занимают краевое положение. После отщепления от комплексов свободные сиаловые кислоты инактивируют многие бактериальные и вирусные болезнетворные агенты, поэтому увеличесние содержания в крови сиаловых кислот может быть проявлением компенсаторной, защитной воспалительной реакции. В моче сиаловые кислоты обнаруживаются только при протеинурии.

Увеличение концентрации сиаловых кислот в крови наблюдается при:

· Ревматизме.

· Туберкулезе (особенно активном).

· Инфаркте миокарда.

· Раке.

· Остеомиелите.

· Лейкимии.

· Других заболеваниях преимущественно воспалительного характера, а также сопровождающихся распадом соединительной ткани.

Снижение концентрации сиаловых кислот наблюдается при:

· Гемахроматозе.

· Дегенеративных процессах в ЦНС.

Ответьте на вопросы:

1. Какие вещества относятся к гетерополисахаридам?

2. Какие функции выполняют в организме гетерополисахариды?

3. Почему при воспалительных процессах в крови увеличивается содержиние сиаловых кислот?

4. Почему при заболеваниях сопровождающихся распадом соединительной ткани в крови увеличивается содержиние сиаловых кислот?

5. *Может ли изменяться количество сиаловых кислот при циррозе печени, инфаркте миокарда, почечной недостаточности? Почему?

Практическая работа

«Определения гликозилированного гемоглобина

в венозной и капиллярной крови”

Цели практической работы:

· закрепить знания о сахарном диабете и его диагностике;

· научиться определять количество гликозилированного гемоглобина в крови.

Задания для самостоятельной работы:

1. Перепишите в тетрадь принцип и методику проведения практической работы.

2. Оборудуйте рабочее место для практической работы.

3. Выполните практическую работу.

4. Сделайте необходимые расчеты.

5. Заполните бланк анализа. Оцените полученные результаты.

6. Сделайте вывод по работе и рисунки.

7. Ответьте на дополнительные вопросы.

Принцип:

Метод основан на аффинной хроматографии гликозилированной и негликозилированной фракций гемоглобина в гемолизате крови. Используемый в микроколонках набора сорбент с привитой 3-аминофенилборной кислотой обеспечивает на первой стадии специфическое связывание гликозилированного гемоглобина и его отделение от негликозилированной фракции. На второй стадии происходит полная элюция гликозилированной фракции за счет вытеснения с сорбента сорбитолом.

Измерение оптических плотностей обеих фракций при длине волны 414 им позволяет рассчитать относительное содержание гликозилированного гемоглобина в анализируемой пробе.

Реактивы: 1. Рабочий буферный раствор 1. 2. Рабочий буферный раствор 2. 3. Регенерирующий раствор (уксусная кислота, 10%). 4. Вода дистиллированная; 5. Контрольный образец гликозилированного гемоглобина. 6. Цельная кровь.

Оборудование: 1. Пластиковые микроколонки. 2. Фотоэлектроколориметр. 3. Штатив для пробирок. 4. Пипетки на 0,02 и 5,0 мл. 5. Пробирки химические на 5 мл. 6. Емкость для воды (кастрюля, поддон) на 2-5 л; 7. Бумага фильтровальная; 8. Перчатки резиновые хирургические.

Ход определения:

Подготовительные операции.

· Поместить колбу с рабочим буферным раствором 1 в емкости с воды (температура воды 25 С) и выдержать в течение 15 мин при периодическом перемешивании.

· Промаркировать по 2 стеклянных пробирки для каждого анализируемого образца крови (А и Б).

· Вставить микроколонку в пробирку А и выдержать в течение 15-20 минут при комнатной температуре.