Метод определения группы крови стандартными эритроцитами

Знания

1.1 Методы определения группы крови.

Группу крови можно определить четырьмя методами: стандартными сыворотками по системе АВО; при помощи цоликлонов анти-А и анти-В (моноклональными антителами); определение группы крови со стандартными эритроцитами; перекрестным методом.

Определение группы крови по системе АВО со стандартными сыворотками (рисунок 1)

Стандартные сыворотки двух разных серий 1,2,3 групп крови наносят на чашку Петри пипеткой большой каплей. Затем в каждую каплю сыворотки наносят каплю эритроцитов определяемой крови. Для получения четкой реакции агглютинации капля эритроцитов цельной крови должна быть в 10 раз меньше капли стандартной сыворотки. Капли смешивают стеклянной палочкой в течение 3 минут. Агглютинация обычно появляется в течение 25-30 секунд и к концу второй-третьей минуты бывает довольно четкой. Если агглютинация не наступает в течение 5 минут, то реакция отрицательная. При чтении результатов возможны четыре комбинации: агглютинации нет ни в одной из стандартных сывороток - это группа крови О (I); агглютинации нет с сывороткой группы A(II), но есть в группах О, В - это группа крови A(II); агглютинации нет с сывороткой В, но есть в группах О, А - это группа крови B(III); агглютинация есть во всех группах сывороток О, А, В, - это группа крови АВ (IV). При получении агглютинации во всех пробах необходимо провести реакцию со стандартной сывороткой 4 группы.

В наборе для определения групп крови по системе АВО должно быть 8 ампул со стандартными сыворотками, по две каждой группы крови. На каждой ампуле должны быть указаны серия, срок годности,·титр. Ампула с определенной группой крови должна быть своего цвета.

Результат реакции со стандартными сыворотками группы:	Исследуемая кровь принадлежит к группе
0 αβ(I)	Aβ(II)	Bα(III)
	0(I)
			А (II)
	В (III)
Контроль с сывороткой группы АВ (IV)	АВ(IV)

Рисунок 1. Результаты определения групп крови по системе АВО с помощью стандартных сывороток

Метод определения группы крови с цоликлонами (рисунок 2)

Для этого цоликлоны анти-А и анти-В и определяемую кровь наносят на чашку Петри в соотношении 1:10. Стеклянной палочкой смешивают исследуемую кровь с каждым видом антител. Через 3 минуты оценивают результаты по следующей схеме: агглютинации нет - группа крови О (I); агглютинация есть с анти-А - группа крови A(II); агглютинация есть с анти-В - группа крови В(III); агглютинация в двух пробах - группа крови АВ (IY).

Цоликлоны	Цоликлоны
Анти - А	Анти - В	Анти -А	Анти - В

Группа крови 0 (I)	Группа крови А (II)

Группа крови В (III)	Группа крови АВ (IV)

Рисунок 2. Результаты определения группы крови с помощью цоликлонов

Метод определения группы крови стандартными эритроцитами

На чашку Петри наносят по капле сыворотки больного, чью группу крови необходимо определить. Рядом наносят по капле стандартных эритроцитов 1,2,3 групп крови. Стандартные эритроциты в соотношении 1:10 смешивают стеклянной палочкой с каждой сывороткой и перемешивают в течение 3 минут. Для исключения неспецифической агглютинации в каждую пробу добавляют по капле физ. раствора и оценивают результат как в пробе со стандартными сыворотками (рисунок 3).

Перекрестный метод определения группы крови (рисунок 3)