Знакомство с техникой безопасности при работе с потенциально опасными биологическими жидкостями

Под руководством преподавателя познакомиться с «Инструкцией по технике безопасности при работе с кровью», сделать в тетради краткий конспект основных положений инструкции. Все работы с кровью проводятся преподавателем в виде демонстрационного эксперимента.

Работа № 2.

Наблюдение осмотического гемолиза эритроцитов.

В работе используютпробирки с растворами хлорида натрия в убывающей концентрации. Можно использовать пробирки с растворами: 0,9% NaCl, 0,6% NaCl и 0,3% NaCl. В каждую пробирку добавляют по одинаковой капле крови. Покачивая каждую пробирку, перемешивают ее содержимое. Через час после добавления крови, оценивают результат.

При полном гемолизе раствор в пробирке равномерно окрашен и прозрачен («лаковая» кровь). При отсутствии гемолиза, раствор бесцветный, прозрачный, эритроциты оседают на дно. При частичном гемолизе на дно оседают наиболее устойчивые эритроциты, часть эритроцитов разрушается, окрашивая раствор в красный цвет.

При оформлении протокола кратко опишите ход работы, зарисуйте пробирки с полученным раствором. В выводе охарактеризуйте полученные результаты, дайте характеристику осмотическому давлению плазмы крови, укажите возможные последствия отклонения этого показателя и наблюдаемые при этом явления.

Ситуационные задачи:

1. При хроническом недоедании, особенно при длительном недостатке белков, у людей развиваются так называемые «голодные отеки». Какие изменения состава крови способствуют возникновению такого состояния?

2. Рассмотрите следующий анализ крови и дайте свое заключение: уд. В. Плазмы - 1,040, рН венозной крови – 7,25 , глюкоза – 10 ммоль/л.

3. При исследовании крови количество фибриногена оказалось равным 5 г/л, общий белок – 90 г/л, минеральных солей – 1 %. Оценить показатели.

4. На лабораторном столе находятся неподписанные колбы с растворами хлористого натрия. Известно, что в одну из них налит 0,9 % раствор, в другую 0,2 % раствор. Как установить концентрацию раствора в каждой колбе, воспользовавшись каплей крови человека?

5. При помещении в раствор поваренной соли эритроциты приобрели шарообразный вид. Каковы причины изменения формы эритроцитов? Какова приблизительно концентрация соли в этом растворе? Как называется этот процесс?

Занятие № 6

Тема занятия: Морфофункциональная характеристика

Эритроцитов крови человека.

Цель занятия:изучить морфологическую и функциональную характеристику эритроцитов человека, познакомиться с эритропоэзом, проанализировать возможные причины нарушения функционирования системы эритрона.

Знать	Уметь
1. Строение и функции эритроцитов, их количество в крови человека, виды возможных отклонений параметра. 2. Состав и свойства гемоглобина, физиологические и патологические формы гемоглобина	1. Оценивать показатели количества эритроцитов, ретикулоцитов, концентрации гемоглобина и цветового показателя в общем анализе крови. Пояснять возможные причины наблюдаемых отклонений.

Рекомендуемая литература:

1. Лекционный материал.

2. Алипов, Н.Н. Основы медицинской физиологии [Текст] / Н.Н.Алипов // М.: Гэотар-медиа, 2008. – 423 с.

3. Физиология человека: Учебник [Текст] / Под ред. В.М.Покровского, Г.Ф. Коротько // М.:Медицина, 2007. – 656 с.

Дополнительная информация:

Таблица 3

Количественные показатели эритроцитов

Количество эритроцитов	4,0-5,1х10¹²/л у мужчин 3,9-4,7х 10¹²/л у женщин
Количество ретикулоцитов	0,8-1% всех эритроцитов
Диаметр эритроцита	7,5-8,0 мкм
Продолжительность жизни эритроцитов	80-120 суток
Количество гемоглобина в одном эритроците	31-35 пг
Цветовой показатель (фарб-индекс)	0,85-1,05
Количество гемоглобина	132 -160 г/л у мужчин, 120-140 г/л у женщин

Контрольные вопросы для самостоятельной внеаудиторной работы:

1) Физиология эритроцитов: строение и функции, количественное содержание в крови. Понятие ретикулоцита. Количество ретикулоцитов в крови.

2) Понятие об истинном и ложном эритроцитозе, эритропении. Понятие об анизо- и пойкилоцитозе.

3) Понятие эритрона. Роль депо крови.

4) Гемоглобин, функции, виды и соединения гемоглобина, методы определения количества гемоглобина в крови

5) Цветовой показатель, его определение, клиническое значение.

6) В тетради для самоподготовки в виде схемы представьте последовательность этапов эритропоэза.

ЛАБОРАТОРНАЯ РАБОТА

Работа № 1.

Подсчет эритроцитов в исследуемой крови.

Для подсчета количества эритроцитов используется счетная камера Горяева. Она представляет собой толстое стекло, в средней части которого имеется 4 желобка. Между ними образуются 3 узкие пластинки. Средняя пластинка ниже боковых на 0,1 мм и разделена пополам поперечным желобком. По обе стороны от желобка расположены сетки Горяева. Так как высота боковых пластинок на 0,1 мм больше средней, то при наложении на них покровного стекла над сеткой образуется камера глубиной в 0,1 мм. Сетка Горяева состоит из 225 больших квадратов Каждый третий квадрат разделен дополнительно поперечными и продольными линиями на 16 маленьких квадратиков. Таких больших квадратов, разделенных на малые, в сетке 25. Сторона малого квадратика равняется 1/20 мм, площадь - 1/400 мм². Так называемый «объем малого квадрата» равен 1/400 мм³.

Для счета эритроцитов кровь разводят в 200 раз 1% раствором хлорида натрия. Для разведения крови используют особый эритроцитарный меланжер (смеситель)

Считают количество эритроцитов в 80 малых квадратах, т.е. в 5 больших, разделенных на 16 малых. Поскольку эритроциты располагаются в беспорядке и некоторые из них лежат на границах квадратов, для получения точного результата принято считать эритроциты, лежащие внутри квадрата и на верхней и левой границах. Вычисляют среднее количество эритроцитов в 1 мм³ неразведенной крови по формуле:

Х = А х 4000 х 200

где Х – число эритроцитов в 1 мкл крови

А – количество эритроцитов, найденных в 80 квадратах

200 – разведение крови

4000 - 1/4000 мкл объем камеры над малым квадратом

80 – число просмотренных квадратов.

В выводе необходимо обсудить полученный результат и причины возможных отклонений изучаемого показателя.

Работа № 2.