I. Вирусы полиомиелита и энтеровирусы А-Д
1. Обозначить на рисунке основные структурные элементы вириона пикорнавирусов.
___ ___ ___ ___ ___ ___ ___ |
2. Изучить схему репродукции пикорнавирусов и написать основные её этапы.
___ ___ ___ ___ ___ ___ ___ ___ ___ |
3. Указать способы культивирования пикорнавирусов и методы их индикации: ____
____
____
4. Выявить цитопатическое действие вирусов в культуре клеток Hep -2, зараженных фильтратом из испражнений больного c подозрением на энтеровирусную инфекцию. Вывод: ____________________
_____
5. Учесть реакцию нейтрализации энтеровирусов по бляшкообразованию в культуре клеток под бентонитовым покрытием (демонстрация).
6. Произвести заражение однодневных мышей-сосунков материалом, содержащим вирус Коксаки В.
7. Учесть реакцию связывания комплемента с парными сыворотками больного энтеровирусной инфекцией. Записать результаты и сделать вывод: ____
8. Дополнить схему лабораторной диагностики энтеровирусной инфекции.
Исследуемый материал: | | ||||
___________________метод | ____________________метод | _________________метод | |||
1. Выделение и накопление вирусов:____________________ ____________________________ | Заражение мышей-сосунков: - вирусы ECHO не патогенны; - вирусы Коксаки А вызывают диффузный миозит; | Выявление АТ в сыворотках крови: РСК РН | |||
2. Индикация вирусов: ________ ____________________________ | - вирусы Коксаки В поражают ЦНС и вызывают развитие параличей. | ||||
3. Идентификация вирусов: РН РСК | ________________ метод ПЦР (выявление___________) |
9. Указать механизм действия противовирусного препарата Pleconaril, применяемого для лечения заболеваний, вызываемых пикорнавирусами: ____
____
10. Ознакомиться с препаратами, применяемыми для специфической профилактики и диагностики полиомиелита и энтеровирусных инфекций (полиомиелитные аттенуированная и инактивированная вакцины, диагностические иммунные сыворотки, вирусные антигены).
11. Дать характеристику полиомиелитным вакцинам, указать их преимущества и недостатки:
IPV (инактивированная полиомиелитная Солка)_____________________________
____
____
OPV (живая вакцина Сэбина)__________
____
____
Примечания:
* По современной классификации род энтеровирусов человека подразделяют на основании молекулярно-биологических характеристик на следующие виды:
Вид | Серотип |
Вирус полиомиелита | 1-3 |
Энтеровирусы А – НЕV A | Коксаки А - 2-8, 10, 12, 14, 16; EV – 71, 76, 89-91 |
Энтеровирусы B – НЕV B | Коксаки А – 9; Коксаки В – 1-6; ECHO – 1-7, 9, 11-21, 24-27, 29-33; EV – 69, 73-75, 77-88, 95; EV – 100-110; |
Энтеровирусы C – НЕV C | Коксаки А – 1, 11, 13, 15, 17-21, 24 |
Энтеровирусы D – НЕV D | EV – 68, 70, 94 |
** Серозный менингит могут вызывать вирусы Коксаки А 2, 4, 9, 10 серотипов, Коксаки В 1-6 серотипов, вирусы ECHO 1-11, 13-22, 25, 27, 29-31 серотипов.
II.Вирусы гепатитов с фекально-оральным механизмом заражения
1. Обозначить на рисунках основные структурные элементы вирионов вирусов гепатитов и дописать названия семейств и родов к которым они относятся.
HAVСемейство_____________________ Род___________________________ | ||
HЕVСемейство_____________________ Род___________________________ |
2. Ознакомиться с диагностическими тест-системами для постановки ИФА с целью выявления вирусных антигенов или антител к вирусам гепатитовА, Е. Демонстрация выявления вируса гепатита А в фекалиях больного методом ИФА.
3. Ознакомиться с методом экспресс-диагностики – постановкой ПЦР и обратной ПЦР с использованием пар праймеров к консервативным участкам геномов вирусов гепатита.
4. Дополнить схему лабораторной диагностики гепатитов А и Е.
Исследуемый материал: | | |||
_____________метод | ___________________метод | |||
1. Выявление АГ вирусов ИФА РИФ | Выявление АТ: Ig M ИФА | |||
2. Выявление генов вируса ПЦР | Ig G |
5. Изучить препараты для лечения и профилактики вирусного гепатита А (интерфероны, противовирусные химические препараты – ламивудин, рибавирин, вакцины ).
6. Перечислить вакцины против гепатита А по способу их получения:
___
Подпись преподавателя ________________
Дата____________
Занятие 11
Тема:Ортомиксовирусы. Лабораторная диагностика гриппа.
Парамиксовирусы. Лабораторная диагностика парагриппа, кори, эпидеми-ческого паротита.
СРС: Аденовирусы. Лабораторная диагностика аденовирусных инфекций.
Вопросы для обсуждения:
- Характеристика и классификация семейства Orthomyxoviridae.
- Морфология и ультраструктура вириона ортомиксовирусов.
- Антигенная структура рода Influenzavirus.
- Антигенный дрейф и шифт вирусов гриппа типа А.
- Культивирование и репродукция вирусов гриппа.
- Отличия вирусов гриппа типов А, В и С.
- Патогенез и клинические проявления гриппа.
- Формирование иммунитета при гриппе.
- Лабораторная диагностика гриппа.
- Противовирусные противогриппозные химио– и иммунобиологические препараты.
- Классификация и характеристика семейства Paramyxoviridae.
12. Морфология и ультраструктура вириона парамикосвирусов.
13. Культивирование и репродукция парамиксовирусов.
14. Род Respirovirus. Вирусы парагриппа: структура вириона и антигенные свойства.
15. Патогенез и клинические проявления парагриппа.
16. Лабораторная диагностика парагриппа.
17. Род Rubulavirus. Характеристика свойств вируса эпидемического паротита.
18. Патогенез и клинические проявления паротита.
19. Род Morbillivirus. Характеристика свойств вируса кори и вируса подострого склерозирую-
щего панэнцефалита (ПСПЭ).
20. Патогенез и клинические проявления кори.
21. Специфическая профилактика кори и паротита.
22. Факторы, способствующие развитию ПСПЭ – медленной инфекции.
23. Род Pneumovirus. Характеристика свойств респираторно-синцитиального вируса (РС – вирус).
24. Род Metapneumovirus. Роль метапневмовирусов в развитии заболеваний дыхательных путей детей первого года жизни.
Практические задания:
I. Вирусы гриппа.
1. Обозначить на рисунке основные структурные элементы вириона ортомиксовирусов.
___ ___ ___ ___ ___ ___ ___ |
2. Изучить схему репродукции вирусов гриппа и написать основные её этапы.
___ ___ ___ ___ ___ ___ ___ ___ ___ |
3. Указать способы культивирования вирусов гриппа и методы их индикации: ___
___
___
4. Промикроскопировать в люминесцентном микроскопе мазки, приготовленные из носоглоточного смыва больного и обработанные противогриппозными иммунофлюоресцирующими сыворотками.
Вывод:_____________________________
5. Учесть реакцию гемагглютинации с аллантоисной жидкостью куриного эмбриона, зараженного носоглоточным смывом больного гриппом. Зарисовать и сделать вывод.
| ||||||||
1:4 | 1:8 | 1:16 | 1:32 | 1:64 | Контроль -0,85% NaCl |
Разведения аллантоисной жидкости, полученной из куриного эмбриона, зараженного носоглоточным смывом больного с подозрением на «грипп» и выдержанного в термостате при t 37°С в течение 72 ч.
Вывод: ______________________________
____
6. Определить подтип гемагглютинина вируса гриппа по результатам реакции торможения гемагглютинации (РТГА).
Н1 | ||||||
Н2 | ||||||
Н3 |
Вывод: _______________________________
7. Учесть реакцию связывания комплемента с парными сыворотками больного гриппом.
1-я сыворотка крови больного | |
2-я сыворотка крови больного | 1:10 1:20 1:40 1:80 1:160 1:320 к/с к/аг |
Вывод: ______________________________
____
8. Ознакомиться с диагностическими тест- системами для постановки ИФА, применяемыми для экспресс-диагностики гриппа.
9. Дополнить схему лабораторной диагностики гриппа.
Исследуемый материал: | | |||||||||
_____________метод | ____________________метод | _________________метод | ||||||||
РИФ (Выявление …………) | 1. Выделение и накопление вирусов: К/Э К/К | Выявление АТ в парных сыворотках крови: РТГА | ||||||||
ПЦР (Выявление ………..) | 2. Индикация вирусов: РГА РГадс. | РСК ИФА | ||||||||
3. Идентификация вирусов: РТГА РТГадс РСК ИФА Реакция ингибирования нейраминидазы |
10. Изучить препараты для диагностики, профилактики и лечения гриппа: наборы диагностических иммунных сывороток, вирусные антигены, иммуноглобулины, вакцины, интерферон, интерфероногены, ремантадин, озельтамивир (тамифлю), занамивир (реленза), оксолин.
11.Указать механизмы противовирусного действия химиопрепаратов:
ремантадин _________________________
озельтамивир(тамифлю) _______________
занамивир (реленза) __________________
12. Перечислить гриппозные вакцины по способу их получения: _______________
____
____
____
II. Парамиксовирусы
1. Обозначить на рисунке основные структурные элементы вириона парамиксовирусов.
___ ___ ___ ___ ___ ___ ___ |
2. Изучить схему репродукции парамиксовирусов и написать основные её этапы.
_______________________________ _______________________________ _______________________________ _______________________________ _______________________________ _______________________________ _______________________________ _______________________________ |
3. Указать способы культивирования вирусов парагриппа и методы их индикации: ________
________
4.Учесть РСК с парными сыворотками больного парагриппом:
1-я сыворотка крови больного | |
2-я сыворотка крови больного | 1:10 1:20 1:40 1:80 1:160 1:320 к/с к/аг |
Учет результата: _______________________
Вывод: ______________________________
5. Ознакомиться с диагностическими тест-системами для постановки ИФА при подозрении на парагрипп, РС – инфекцию.
6. Дополнить схему лабораторной диагностики парагриппа.
Исследуемый материал: | ||
_____________метод | ____________________метод | _________________метод |
РИФ (Выявление …………) | 1. Выделение и накопление вирусов:____________________ ____________________________ | Выявление АТ в парных сыворотках крови: РСК |
ПЦР (Выявление …………) | 2. Индикация вирусов: ________ ____________________________ | РТГадс ИФА |
3. Идентификация вирусов: ___ ___________________________ |
7. Изучить препараты для диагностики, профилактики и лечения парагриппа, кори, паротита, РС – инфекции (диагностические иммунные сыворотки, вирусные антигены, иммуноглобулины, вакцины, интерфероны).
8. Дать характеристику вакцинам.
Коревая вакцина ______________________
____
Паротитная вакцина ___________________
____