Синтез ДНК – репликация

Человека всегда интересовал вопрос, каким образом происходит передача наследственных признаков.

И вот на рубеже 19 и 20 веков генетические и цитологические исследования привели к выводу, что ответственными за передачу признаков по наследству являются хромосомы. При этом оказалось, что определенный признак передается с определенным участком хромосомы – геном.

Всему набору признаков организма (голубые глаза, темные волосы, прямой нос и т.д.) соответствует набор генов всех хромосом – генотип.

Поскольку хромосомы содержат белок и ДНК, возник вопрос, какое из веществ участвует в передаче наследственных признаков. В 40-50-е годы ХХ века появилось много экспериментальных данных на то, что передача наследственной информации осуществляется молекулами ДНК.

Общее содержание ДНК в одной клетке постоянно, количество ее в процессе жизненного цикла клетки практически не меняется.

Но в период деления клетки оно резко возрастает, и, как показали исследования, концентрация ДНК увеличивается ровно в два раза. После клеточного деления содержание ДНК в дочерних клетках такое же, каким оно было и в материнской клетке.

Каким же образом происходит удвоение, или как часто говорят, репликация молекул ДНК? Ответ на этот вопрос был получен на основании структурной модели строения ДНК, разработанной Уотсоном и Криком в 1953 г. Структура двойной спирали позволяла представить следующий механизм репликации ДНК.

При репликации молекул ДНК в период клеточного деления прежде всего разрываются водородные связи между цепями, двойная спираль раскручивается, цепи расходятся. Под действием соответствующих ферментов к каждой из одиночных цепей присоединяются новые нуклеотиды. Но так как сочетание нуклеотидов может быть только строго определенным, то на каждой образовавшейся цепи строится вторая комплементарная цепь, образуя новые молекулы ДНК прежнего состава.

Процесс удвоения ДНК представлен на схеме:

Реакцию синтеза ДНК можно представить такой схемой:

m(gАТФ + gТТФ) + n(gГТФ + gЦТФ)

ДНК + (m +n) Н₄Р₂О₇

Отметим важнейшие особенности реакции:

1. Субстратами служат трифосфаты дезоксирибонуклеозидов. В ходе реакции от каждого из них отщепляется пирофосфатный остаток; при этом выделяется энергия, которая затрачивается на включение каждого мономера в молекулу ДНК.

2. Реакция идет в присутствии готовой ДНК, выполняющей роль матрицы. Все вновь синтезируемые молекулы ДНК имеют первичную структуру, идентичную первичной структуре ДНК-матрицы.

3. Поскольку в молекуле ДНК нуклеотидные остатки образуют пары А-Т; и Г-Ц, то в реакции расходуются одинаковое количество дАТФ и дТТФ и одинаковое количества дГТФ и дЦТФ.

Так как в молекуле ДНК записана генетическая информация (т.е. какие белки должны синтезироваться в клетке), то процесс удвоения ДНК в материнской клетке и последующее распределение копий поровну между дочерними клетками есть ни что иное, как передача генетической информации от поколения к поколению. Такой способ репликации получил название полуконсервативного. Репликация происходит при участии сложного набора белков, образующих репликативный комплекс. В него, в частности, входят белки, раскручивающие спираль ДНК, в результате чего образуется репликативная вилка. Затем при участии ДНК-полимеразы (репликазы) образуются новые полинуклеотидные цепи. Синтез новых цепей всегда идет в направлении от 5¢- конца к 3¢- концу. Поэтому на одной из ветвей репликативной вилки новая цепь наращивается непрерывно по мере раскручивания ДНК- матрицы. На другой ветви по мере раскручивания ДНК образуются короткие фрагменты новой цепи – фрагменты Оказаки. Затем концы этих фрагментов соединяются между собой в результате действия ДНК- лигазы (рис 2).

Рисунок 2 – Схема репликации ДНК

В данной схеме приведены лишь основные этапы репликации; в действительности этапов репликации значительно больше, в них участвуют специальные белки. В настоящее время установлено около десятка белков репликативного комплекса. Таким образом, благодаря принципу комплементарности полинуклеотидных цепей из одной исходной молекулы ДНК образуются две совершенно одинаковые, новые молекулы ДНК. Способность ДНК давать строго определенные, подобные себе, новые молекулы играют определяющую роль в явлениях наследственности и в передаче генетической информации от поколения к поколению.

Другими словами, информация, записанная в ДНК (в генотипе), обеспечивает образование фенотипических признаков (окраска цветка, цвет волос, форма крыльев и т.д.) организма, трансформируется в фенотип.

В 40-50-е годы это представление о связи между генотипом и фенотипом было экспериментально подтверждено на многих ферментах и других белках разных организмов; результаты нашли отражение в афористической формуле один ген – один белок. ДНК сосредоточена главным образом в ядре, синтез же белка происходит в другом месте (в рибосомах). Роль промежуточного переносчика информации от ДНК к месту синтеза белка выполняют рибонуклеиновые кислоты. Их роль в процессе биосинтеза белка различна.

Направление потока информации в клетке от генотипа к фенотипу представляют так:

ДНК ® РНК ® белки.

^{транскрипция трансляция}

Иначе говоря, ДНК служит матрицей для синтеза всех РНК, а РНК – матрицей для синтеза белков. Это положение называют основным постулатом молекулярной биохимии.