Развитие гистологии, цитологии и эмбриологии в беларуси
Систематическое развитие в Беларуси гистология с цитологией и эмбриологией получила с момента образования в республике медицинских институтов и кафедр гистологии. Первым созданным в Беларуси медицинским вузом является Минский медицинский институт. Кафедра гистологии в нем была открыта в 1921 году, ее первым заведующим (точнее, заведующим двух кафедр — патологической анатомии и гистологии) был заведующий гистолого-бактериологическим отделением Московской лаборатории А.Н. Лунц, а затем короткое время — врач С.Л. Эйнгорн. В 1924 году на должность заведующего кафедрой гистологии избирается профессор П.А. Мавродиади, до этого работавший профессором кафедры зоологии Донского университета. С приходом его на кафедру были преодолены материальные трудности, существовавшие до этого, и коллектив кафедры, включавший помимо профессора П.А. Мавродиади двух ассистентов, смог организовать полноценное преподавание предмета студентам. Одновременно кафедра стала проводить научные исследования. П.А. Мавродиади, имея широкое биологическое образование и прекрасно владевший цитологическими и гистологическими методами исследования, стал инициатором научных исследований по цитофизиологии. В частности, им и его сотрудниками П.Я. Герке и Е.Г. Станкевич исследовались ритмические явления в строении клеток и их составных частей, в первую очередь ядрышек и хромосом. П.А. Мавродиади выдвинул ряд оригинальных представлений о возникновении, структуре и функции клетки. 13 1932—1934 гг. кафедру возглавлял профессор СИ. Лебедкин. Под его руководством выполнялись и основном эмбриологические исследования (П.Я. Герке, Е.М. Зубкович, Е.Г. Станкевич). Короткое время (1934 год) кафедрой заведовал также профессор Г.Ф. Соболев, под руководством которого исследовалось влияние на процессы кроветворения местного рентгеновского облучения конечностей.
После переезда профессора Г.Ф. Соболева в 1935 году в Москву кафедрой руководил ученик НА. Мавродиади и СИ. Лебедкииа П.Я. Герке. С его приходом начинается новый этап научных исследований, посвященных эмбриогенезу человека и животных. Одновременно развиваются и некоторые другие научные направления: строение так называемой лимфоэпи-телиальной системычеловека и животных, строение кожи в норме и при патологии и др. При этом сотрудники кафедры взаимодействовали с такими известными гистологами, как А.А. Заварзин и Б.И. Лаврентьев, которые не только консультировали при освоении гистологических методик, но и давали отзывы па научную продукцию научных работников кафедры. В 1951 году П.Я. Герке избирается академиком Академии наук Латвийской ССР и переезжает в г. Ригу. Кафедрой начинает заведовать профессор СМ. Миленков, до этого руководивший кафедрой гистологии Ташкентского медицинского института. Меняется тематика научных исследований, которая теперь посвящена изменениям нервного аппарата ряда органов при различных экспериментальных и патологических условиях, а позднее — проблеме взаимоотношений гипоталамуса и желез внутренней секреции. Выполнены фундаментальные исследования по гис-тофизиологии и развитию надпочечника (А.А. Артишевкий), вилочковой железы (А.И. Сыкало), вегетативных ганглиев (Е.И. Болынова), поджелудочной железы (А.В. Пищинский).
С 1971 по 1997 год кафедрой заведовал ученик видного белорусского морфолога академика Д.М. Голуба профессор А.С Леонтюк. Под его руководством на кафедре на основе системного подхода изучаются этапы морфогенеза и становления гистофизиологии органов различных систем организма. В научные исследования широко внедряются математические методы, которые и в настоящее время продолжают широко практиковаться сотрудниками кафедры. С 1997 года кафедрой руководит ученик академика Д.М. Голуба и профессора А.С Леонтюка профессор Б.А. Слука. Итогом многолетней работы коллектива кафедры является издание целого ряда получивших признание монографий и учебных пособий монографического характера, среди которых следует отметить такие, как "Надпочечные железы" (1977, проф. А.А. Артишевский); "Периферические органы системы иммунитета" (асе. Н.А. Жарикова); "Информационный анализ в морфологических исследованиях" (проф. А.С. Леонтюк и соавт.); "Возрастная гистология" (1996, в 5 томах, коллектив авторов); "Основы возрастной гистологии" (А.С. Леонтюк, Б.А. Слука); "Гистология в вопросах и ответах"(1997, коллектив авторов), учебник по гистологии для медицинских училищ (А.А. Артишевский, А.С. Леонтюк, Б.А. Слука) и др.
В 1934 году открывается второй медицинский институт Беларуси — Витебский. Кафедра гистологии, цитологии и эмбриологии была создана в этом же году. Организатором и первым се руководителем был доцент B.C. Клиницкий, одновременно заведовавший кафедрой гистологии ветеринарного института. В дальнейшем кафедрой непродолжительное время руководил доцент Л.И. Фалин, в последующем известный гистолог и эмбриолог, автор атласов по гистологии и эмбриологии, а также ряда монографий. Интересно, что Л.И. Фалин одновременно заведовал кафедрой гистологии Смоленского медицинского института. В это время кафедра располагала минимальными средствами для выполнения педагогической работы, которая была прервана начавшейся Великой Отечественной войной. Работа кафедры была возобновлена в 1946 году. С 1946 по 1948 г. кафедрой по совместительству заведовала доцент Б.М. Кичина.
В 1948 году для заведования кафедрой из Москвы приезжает доцент В.Н. Блюмкин. Он направил свои усилия на совершенствование материально-технической базы кафедры, организовал проведение научных исследований по отдельной тематике, которая была посвящена функциональной гистологии, иейрогистологии и гистохимии провизорных органов и серозных оболочек.
С 1962 по 1975 год кафедрой заведовал доцент Е.Я. Корытный. Научная тематика кафедры была посвящена реактивным свойствам соединительной, мышечной и нервной тканей и легла в основу четырех успешно защищенных кандидатских диссертаций. На этот период приходится издание доцентом М.П. Медведевой "Альбома учебных заданий по гистологии" в двух томах. Настоящее учебное пособие было высоко оценено как студентами, так и многими кафедрами гистологии медвузов СССР. С 1975 по 1978 год в связи с болезнью доцента Е.Я. Корытного обязанности заведующего кафедрой выполняла доцент М.П. Медведева.
С 1978 по 1996 год кафедрой руководил ученик профессора В.Г. Елисеева профессор А.Ф. Суханов, до этого заведовавший кафедрой гистологии Кемеровского медицинского института. В этот период происходило дальнейшее совершенствование материально-технической базы кафедры, в особенности ее учебно-методической работы. Были изданы отдельными книгами 3 учебных пособия ("Методические рекомендации и учебные задания по программированному контролю исходных знаний по гистологии" (1980 г.). и "Методические разработки по гистологии для студентов 1 и 2 курсов" (1982, 1984 г.). Научная тематика кафедры проводилась по двум направлениям: "Морфогенез клеток и тканей в экстремальных условиях" и "Структурно-функциональные механизмы повреждений и регенерации клеток и тканей при измененном температурном гомеостазе". С 1996 года кафедрой заведует профессор О.Д. Мяделед. Совершенствуется преподавание предмета. В 1995—1997 годах профессором О.Д. Мядель-цем были изданы "Курс лекций по общей гистологии, цитологии и эмбриологии для иностранных студентов", "Курс лекций по частной гистологии", "Краткий практикум по гистологии". Научная тематика кафедры посвящена изучению морфологических аспектов диагностики и лечения хронических дерматозов человека. По результатам НИР, которая проводится в тесном сотрудничестве с кафедрой дерматологии, изданы совместные с кафедрой дерматологии ВГМУ монографии "Функциональная морфология и общая патология кожи", "Алопеция", "Дерматозы эозинофильные и нейтрофилыше". Издана также монография "Клеточные механизмы барьерно-защитной функции кожи и их нарушения при кожной патологии" (проф. Мяделец О.Д.). Вышли в свет учебные пособия "Цитология, эмбриология и общая гистология" и "Основы частной гистологии" (проф. Мяделец О.Д.). Научные исследования кафедры приобретают прикладной характер.
В 1959 году в Беларуси открывается третий медицинский ВУЗ — Гродненский медицинский институт. Первым заведующим кафедрой гистологии являлся профессор И.И. Хворостухин, под руководством которого изучались регенераторные свойства костных и хрящевых тканей, а также влияние рентгеновских лучей на развитие плаценты (А.П. Никонов). Сменивший его на этом посту профессор А.А. Туревский изучал изменения в желудке под влиянием гормональных препаратов, а затем под его руководством проводились обширные и разносторонние исследования, посвященные изменениям в организме при искусственной ахолии. С 1997 года кафедрой заведует профессор Я.Р. Мацюк, известный своими исследованиями по гистофизиологии желудочных желез в условиях нарушения содержания в организме глюкокортикоидов и половых гормонов, а также становлению органов мужской половой системы в норме и при действии экстремальных факторов внешней среды.
В 1990 году организуется четвертый медицинский ВУЗ Беларуси — Гомельский, кафедру гистологии, цитологии и эмбриологии в котором возглавляет доцент Т.Г. Матюхина.
В 1948 году в Беларуси создано Белорусское общество анатомов, гистологов и эмбриологов, которое координирует морфологические исследования в республике.
Кроме медицинских институтов, интенсивные гистологические исследования проводились и проводятся также в институте физиологии АН Республики Беларусь (академик Д.М. Голуб, д.м.н. Л.А. Леонтюк, д.м.н. Л.И. Арчакова и др.). Глубокие исследования по гистофизиологии и эмбриогенезу нервной системы проводятся на кафедре анатомии Минского медицинского института под руководством профессора П.И. Лобко.
Глава 2
МЕТОДЫ ИССЛЕДОВАНИЯ В ГИСТОЛОГИИ.
МИКРОСКОПИЧЕСКАЯ
И ГИСТОЛОГИЧЕСКАЯ ТЕХНИКА
Гистология, цитология и эмбриология имеют собственные методы исследования, как классические, так и современные. Эти методы исследования используются не только для изучения строения и функций клеток, тканей и органов, но и находят все более широкое применение в клинической практике. Все они базируются на микроскопии гистологических объектов, обработанных специальными способами. Поэтому условно гистологические методы исследования можно разделить на микроскопические (микроскопическая техника)и методы обработки гистологического препарата, подготовки его к микроскопированию (гистологическая техника).
МИКРОСКОПИЧЕСКАЯ ТЕХНИКА
Для гистологических исследований используется прибор МИКРОСКОП. В зависимости от того, что используется для просвечивания гистологического объекта, различают две основные группы микроскопов: световыеи электронные.В световых микроскопах для просвечивания объекта используется световой поток. Для электронной микроскопии в этих целях применяется пучок электронов.
СВЕТОВАЯ МИКРОСКОПИЯ
Подробно устройство светового микроскопа изучается на кафедре биологической и медицинской физики. Общий вид светового микроскопа показан на рис. 2.1.
Световая микроскопия подразделяется на стандартную световую микроскопиюи специальные методы световой микроскопии.В обоих случаях световой поток, проходя через конденсормикроскопа, концентрируется, далее проходит через гистопрепарат, изменяясь за счет различий преломления гистоструктур препарата. Затем пучок света идет через объектив,в котором формируется изображение. Далее изображение увеличивается системой линз окуляра, после чего воспринимается глазом (Рис. 2.2)
![]() |
Любой микроскоп имеет два основных показателя, характеризующих его возможности:
1. Общее увеличениемикроскопа — соотношение между линейными размерами полученного в микроскопе изображения объекта и истинными размерами этого объекта. Оно определяется как произведение увеличения объектива на увеличение окуляра микроскопа. Общее увеличение светового микроскопа может теоретически достигать 2500 раз, но полезное увеличение,т.е. увеличение, позволяющее выявить детали строения гистологического объекта, составляет не более 1500 раз.
2. Разрешающая способность — наименьшее расстояние между двумя точками объекта, на котором они видны раздельно.Разрешающая способность является более важным показателем микроскопа, чем его увеличение. Повышая разрешающую способность, т.е. уменьшая расстояние раздельного восприятия двух точек гистологического объекта, исследователь будет видеть все более мелкие детали.
Разрешающая способность микроскопа определяется по формуле: d = Х/2, где el — расстояние раздельного видения точек объекта, ~к — длина волны.
Из формулы следует, что для повышения разрешающей способности микроскопа нужно использовать источник света с очень малой длиной волны. Это подтолкнуло ученых к поиску способов увеличить разрешающую способность микроскопа через уменьшение длины волны источника света (ультрафиолетовая и люминесцентная микроскопия), а также к открытию электронного микроскопа, в котором вместо видимого света стали использовать пучок электронов, имеющий очень короткую длину волны.
ВИДЫ СВЕТОВОЙ МИКРОСКОПИИ
1. Стандартный световой микроскоп.В стандартном световом микроскопе для просвечивания гистологических объектов используется видимая часть спектра света. Длина ее волны в среднем равна 0,4 мкм. Следовательно, разрешающая способность светового микроскопа равна примерно 0,2 мкм, а его общее увеличение составляет около 2500 раз (полезное —1500 раз).
2. Ультрафиолетовая микроскопия.В данном случае для просвечивания объекта используется ультрафиолетовая часть спектра, имеющая длину волны 0,2 мкм. Таким образом, разрешающая способность этого микроскопа равна 0,1 мкм, что в 2 раза выше, чем у обычного микроскопа. Так как полученное изображение невидимо для глаза, то оно регистрируется на фотопластинке или люминесцентном экране.
3. Люминесцентная (флуоресцентная) микроскопия.Это метод микроскопии, в котором используется явление люминесценции,или свечения некоторых веществ при воздействии на них коротковолновых лучей. Поглощая коротковолновое излучение, молекулы этих веществ переходят в возбужденное состояние и сами начинают излучать свет, который имеет длину волны большую, чем длина волны возбуждающего света. Такой свет и регистрируется в люминесцентном микроскопе. Коротковолновое излучение и свет люминесценции разделяются при помовш светофильтров. Различают аутолюминесценцию (первичную люминесценцию)и наведенную (вторичную)люминесценцию. При аутолюминесценции гистологический объект испускает свет люминесценции без предварительной обработки. Любая клетка живого организма обладает собственной люминесценцией, которая, однако, в большинстве случаев очень слабая и трудно регистрируется. При наведенной люминесценции объект обрабатывается специальными люминесцирующими красителями, которые связываются с клетками и тканями организма, делая их видимыми. Примером такого красителя является акридиновый оранжевый.Он достаточно прочно связывается с нуклеиновыми кислотами и вызывает красное свечение РНК и зеленое — ДНК. В комплект современных люминесцентных микроскопов включаются фотометрические насадки, позволяющие измерять интенсивность люминесценции, что дает возможность количественного определения связывающего люмииесцирующии краситель вещества.
4. Интерференционная микроскопия.В интерференционном микроскопе падающий на объект световой поток раздваивается. При этом одна его часть идет на объект, а другая — минуя его. Затем два пучка вновь соединяются, и при этом возникает интерференционное изображение объекта. По сдвигу фаз одного пучка относительно другого можно определить точную концентрацию вещества в клетке. Таким образом, интерференционный микроскоп также позволяет осуществлять количественные морфологические исследования.
5. Поляризационная микроскопия.В микроскопах этого типа световой пучок при пом.ощи специальных призм (призмы Николя)разлагается на два луча, поляризованных во взаимно перпендикулярных плоскостях. Проходя через структуры со строгой ориентацией молекул, световые лучи запаздывают относительно друг друга в результате неодинакового их преломления. Далее пучок света пропускается через анализатор, который определяет степень отклонения поляризации света при прохождении через объект. Это позволяет определить характер расположения молекул, например, в миофибриллах, а также наблюдать спиральные или не видимые при других методах исследования структуры.
6. Фазово-контрастная микроскопия— метод изучения клеток в световом микроскопе, который имеет фазово-контрастное устройство. В нем использован принцип неодинакового изменения фаз световых лучей при прохождении их через разные по плотности структуры изучаемого объекта (рис. 2.3). При этом происходит смещение фаз световых волн, что приводит к повышению контрастности структур объекта и позволяет рассматривать неокрашенные и живые клетки. Разновидностью фазово-контрастного микроскопа является темнопольный микроскоп, который дает негативное изображение по сравнению с позитивным фазовоконтрастным изображением.
![]() |