Тема: Якісні реакції на вітаміни та їх визначення.

Дослі 12.1Реакція на тіамін (вітамін В1). Реакція з діазореактивом.

Принцип методу.Метод заснований на здатності вітаміну В1 у лужному середовищі з діазореактивом (суміш солянокислого або сірчанокислого розчину сульфенілової кислоти з розчином нітрату натрію) утворювати складну комплексну сполуку оранжевого або червоного кольору.

Матеріали та реактиви.Розчин сульфанілової кислоти (1%), 5% розчин нітриту натрію, 10%розчин карбонату натрію, тіамін (порошок або його 5% розчин).

Обладнання.Штатив із пробірками, піпетки, шпатель.

Хід роботи.

В пробірку вливають 1 мл розчину сульфанілової кислоти та 1 мл розчину нітриту натрія (утворюється діазореактив). Потім у пробірку вносять невелику кількість (на кінчику шпателя) порошка або 0.5 мл розчину тіаміну й по стінці пробірки оборежно додають 1 мл розчину Nа2СОз. На межі двох рідин з'являється кільце оранжевого або червоного кольору.

Дослідження 12.2 Реакція відновлення рибофлавіну (вітамін В2).

Принцип методу.Під час змішування металічного цинку з концентрованою соляною кислотою утворюється водень, який відновлює жовтий рибофлавін спочатку на родофлавін (проміжне сполучення) червоного кольору, а потім на безбарвний лейкофлавін:

Тема: Якісні реакції на вітаміни та їх визначення. - student2.ru

Матеріали та реактиви.Концентрована соляна кислота, металічний цинк, 0,025% розчин вітаміну В2 (суспензія рибофлавіну у воді).

Обладнання.Штатив із пробірками, піпетка.

Хід роботи.

В пробірку вливають 1 мл розчину вітаміну В2, 0.5 мл концентрованої

соляної кислоти й кидають грудочку металічного цинку. Водень, що

виділяється, реагує з рибофлавіном, відновлюючи його. Рідина в пробірці поступово забарвлюється в рожевий колір, а потім знебарвлюється. Під час збовтування знебарвлений розчин лейкофлавіну знову окислюється киснем повітря на рибофлавін

Дослід 12.3 Реакція на піридоксин (вітамін Вб). Реакція з хлоридом

заліза.

Принцип методу.Під час взаємодії піридоксину з розчином хлориду заліза рідина забарвлюється в червоний колір завдяки утворенню комплексної солі типу феноляту заліза.

Матеріали та реактиви.Водний розчин (1%) вітаміну Вб, 1% розчин FеСІз.

Обладнання.Штатив із пробірками, піпетки.

Хід роботи.

У пробірці перемішують 1 мл водного розчину піридоксину та дві краплі розчину хлоріду заліза. Рідина забарвлюється в червоний колір.

Дослід 12.4 Якісні реакції на рутин (вітамін Р).

Принцип методу.Хлорид заліза (3) утворює з рутином комплексні сполуки, забарвлені в смарагдово-зелений колір. Концентрована сірчана кислота утворює з флавонами та флавонолами флавілієві солі, розчини яких мають яскраво -жовте забарвлення.

Під час кислотного гідролізу рутину відщеплюється молекула рутинози. Потім рутиноза розкладається на глюкозу та рамнозу, які мають відновні властивості.

Матеріали та реактиви.Рутин (порошок і насичений водний розчин), 1% розчин хлориду заліза (3), концентрована сірчана кислота, 0.5% розчин соляної кислоти, 10% розчин гідроксиду натрію, реактив Фелінга (реакції на моносахариди):

Тема: Якісні реакції на вітаміни та їх визначення. - student2.ru

Обладнання.Штатив із пробірками, піпетки.

Хід роботи.

А. Реакція рутину з хлоридом заліза (3). До 2 мл насиченого водного

розчину рутину додають кілька крапель розчину FеСІз, спостерігають

появу зеленого забарвлення.

Б. Реакція рутину з концентрованою сірчаною кислотою. До 2 мл

насиченого водного розчину рутину обережно по стінці пробірки

доливають 1 мл концентрованої сірчаної кислоти. На межі розділення

двох рідин виникає кільце жовтого кольору.

В. Реакція рутину з реактивом Фелінга. До 0.5 г рутину доливають 5 мл

розчину соляної кислоти, кип'ятять протягом 1 хвилини, потім

фільтрують. До 5 мл фільтрату додають 3 мл розчину гідроксиду натрію

та 3 мл свіжовиготовленого реактиву Фелінга й знову нагрівають до

кипіння. Спостерігають утворення осаду геміоксиду міді червоного

кольору.

Дослід 12.5 Якісна реакція на вітамін С.

Принцип методу.Аскорбінова кислота може легко вступати в окисно - відновні реакції й відновлювати гексоціано -(3) - ферат калію або АgNOз. АgNО звідновлюється до металічного срібла. Кз[Fe(СN)6] відновлюється на К4[Fe(СN)б] який із іонами валентного заліза утворює сіль Fе4[Fe(СN)6]3 синього або зеленого кольору.

Матеріали та реактиви.0.1% розчин аскорбінової кислоти, 1% розчин Кз[Fe(СN)6] ; 1% FеСІз .

Хід роботи.

1. До 1 мл розчину аскорбінової кислоти додають 1 мл Кз[Fe(СN)б] і 0.5 мл розчину FеСІ3. Спостерігають утворення синьо - зеленого забарвлення.

2. До 1 мл розчину вітаміна С додають 1-2 краплі АgNО3. Cпостерігають випадіння чорного осаду.

Дослід 12.6Якісна реакція на вітамін А з сірчаною кислотою.

Принцип методу.Вітамін А з концентрованою сірчаною кислотою в бензольному розчині утворює комплекс синього кольору.

Матеріали та реактиви0.05% масляний розчин вітаміну А в хлороформі або розчин риб'ячого жиру в хлороформі в співвідношенні 1:5; концентрована сірчана кислота.

Хід роботи.

Реакція Друммонда.

В пробірку до двох-трьох крапель розчину вітаміну А додають дві-три краплі концентрованої сірчаної кислоти. Вміст пробірки забарвлюється в синій колір, який через деякий час змінюється на фіолетовий і бурий.

Дослід 12.7 Якісні реакції на вітамін Є.

Принцип методу.Взаємодія α-токоферолу з концентрованою азотною кислотою зумовлює забарвлення реакційної суміші в червоний колір. Це спричинено тим, що продукт окислення а-токоферолу має хіноїдну структуру. Під час взаємодії з хлорним залізом (3) α - токоферол окислюється до α -токоферилхінону - сполука червоного кольору.

Тема: Якісні реакції на вітаміни та їх визначення. - student2.ru

Матеріали та реактиви. Спиртовий розчин (0.1 %) α -токоферолу, концентрована азотна кислота,1% розчин хлорного заліза (3).

Обладнання.Штатив із пробірками, крапельниця, піпетки.

Хід роботи.

1. Реакція з азотною кислотою.

В суху пробірку вносять пять краплин розчину вітаміну Є, додають 1 мл

концентрованої НNОз. Інтенсивно перемішують і спостерігають

поступову появу червоного забарвлення.

2. Реакція з хлорним залізом.

У суху пробірку вносять 0.5 мл спиртового розчину а-токоферолу, потім

0.5 мл рочину FеСІ3 й інтенсивно перемішують. Спостерігають появу

червоного забарвлення.

Дослід 12.8 Якісна реакція на вітамін К.

Принцип методу.За наявності аніліну спиртовий розчин вітаміну К забарвлюється в

червоний колір, що зумовлено утворенням І-метил-2-

феніламінонафтохінону.

Хід роботи.

В пробірку з 1 мл спиртового розчину вікасолу додають дві краплини аніліну. Після перемішування вміст пробірки забарвлюється в червоний колір.

Питання і вправи до екперимептальної частини

1. Запропонуйте якісні реакції, за допомогою яких можна визначити тіамін?

2. Як довести наявність вітаміну В2 у овочах?

3. Які якісні реакції ви можете запропонувати для виявлення вітаміну РР?

4. В чому поягає суть якісного визначення вітаміну В6?

5. Запропонуйте якісні реакції на вітамін В12?

6. Як проводять вилучення фолієвої кислоти з дріжджів?

7. В чому полягає суть якісної реакції на рутин?

8. Запропонуйте найбільш ефективний, на ваш погляд, метод якісного визначення вітаміну Д. Свій вибір обгрунтуйте.

ЛАБОРАТОРНА РОБОТА № 14

Наши рекомендации