Особенности электронной микроскопии: электронная волна, электромагнитные «линзы»

1. В электронном микроскопе образец облучается не видимым светом, а пучком электронов.

ü Длина же электронной волны значительно меньше, чем световой.

ü Соответственно, такая волна «чувствует» меньшие препятствия: разрешающая способность микроскопа оказывается выше.

2. Конструктивная же особенность состоит в том, что в электронном микроскопе в качестве линз используются электромагнитные катушки.

Контрольные вопросы:

1.Виды гистологических препаратов

2.Основные требования к гистологическому препарату.

3.Какие гистологические красители относятся к группе основных и какие структуры клетки они окрашивают?

4.Назовите чаще используемую комбинацию водорастворимых красителей.

5.Приведите пример специальных окрасок гистологических препаратов.

Морфология – наука о форме и строении живых организмов, об их индивидуальном (онтогенез) и историческом (филогенез) развитии. Изучать живые организмы можно с различным подходом и на разных уровнях. Значение, положение и роль человека в живой природе – изучает биология. H. sapiens – является объектом исследования многих дисциплин, наиболее значимыми из которых являются: анатомия (строение органов и систем органов), гистология /микроанатомия/ (гистофизиология тканей и органов), цитология (строение и функции клеток), молекулярная биология (строение, функции и химизм внутриклеточных молекул), эмбриология (развитие эмбриона и плода) и физиология (функции органов и систем органов). Не менее важными можно считать и биологическую химию и генетику.

Знание каждой дисциплины в отдельности и всех в упорядоченной совокупности готовит хорошего специалиста!

Гистология – наука, изучающая морфо-функциональные признаки и особенности строения тканей, органов, органо-комплексов и организма в целом, их эволюционные и филогенетические характеристики на атомарном, клеточном и тканевом уровнях организации живой материи, а также их происхождение, размножение, развитие и способы регенерации.

Как учебная дисциплина, гистология включает в себя следующие разделы:

I. Цитология – учение о развитии, строении и жизнедеятельности клеток;

II. Общая гистология – учение о развитии, строении и функциях основных тканевых групп (систем). Выделяют следующие филогенетические пары основных типов тканей: А) эпителиальные + соединительные ткани и Б) мышечные ткани + нервная ткань.

III. Частная гистология – учение о развитии, строении и гистофизиологии органов и систем органов («Нервная система», «Органы чувств», «Эндокринная система», «Сердечно-сосудистая система», «Органы гемопоэза, лимфопоэза и иммуногенеза», «Органы дыхания», «Кожа и её производные», «Органы желудочно-кишечного тракта», «Мочевыделительная система», «Мужская репродуктивная система» и «Женская репродуктивная система»).

IV. Эмбриология – учение о зародыше и закономерностях его развития.

Гистология – фундаментальная наука, изучение которой необходимо для понимания принципов структурной организации живых организмов и важно для клинической медицины. В практической медицине (онкология, хирургия, гинекология, терапия и других) широко используют знания и достижения гистологии и гистологической техники. Особенно гистологические навыки необходимы при исследовании биопсийного материала (биоптата), патологически изменённых органов с целью своевременной диагностики заболеваний, адекватного лечения и профилактики. Знание нормального строения органа помогает в дифференциальной диагностике ряда заболеваний.

Объектами гистологического исследования служат живые и «умершие» (фиксированные) клетки, ткани, органы и их изображения, полученные в световом или электронном микроскопах, или телевизионном экране дисплея.

Семинар №1

«Методы гистологического исследования»

ОСНОВНЫЕ ЭТАПЫ ПРИГОТОВЛЕНИЯ

ГИСТОЛОГИЧЕСКИХ ПРЕПАРАТОВ

Кусочек ткани (1 см3)

Простые фиксаторы: спирт // формалин

ФИКСАЦИЯ

Сложные фиксаторы: спирт + формалин // сулема + уксусная кислота + формалин // специальные смеси

ПРОМЫВКА (удаление фиксатора) – в проточной воде (24 часа)

Обезвоживание и УПЛОТНЕНИЕ в спиртах возрастающей концентрации (от 40 – 50% до 100%)

ПРОПИТКА заливочным материалом: парафином // целлоидином

ЗАЛИВКА(в чистый парафин // целлоидин)

Изготовление блоков

Изготовление срезов (на микротоме)

Помещение среза на предметное стекло

Депарафинизация

ОКРАСКА СРЕЗА
Общая– основными и кислыми красителями	Импрегнация (осаждение металлов Ag, Au, Os на структурах клетки)	Гистохимия

Просветление среза

ЗАКЛЮЧЕНИЕ СРЕЗА в консервированную среду под покровное стекло: бальзам // глицерин – желатин // пластмассы

ГИСТОЛОГИЧЕСКАЯ ЛАБОРАТОРИЯ

Набор инструментов

для аутопсии

Ротационный микротом ↓ Замораживающий

криостат-микротом ↓

← Установка для проводки

Правила микроскопирования:

1. Установить микроскоп перед собой и перевести револьвер на объектив ^{^}8 или ^{^}10 (до «щелчка»).

2. Манипулируя зеркалом (источником света) равномерно осветить поле зрения.

3. Положить предметное стекло с препаратом на предметный столик микроскопа. (Предварительно проверить пальцем наличие покровного стекла сверху препарата).

4. Под контролем глаза (сбоку) опустить объектив на высоту 3 – 5 мм от предметного стекла, взять в руку макровинт, вращать на себя до момента, когда промелькнёт изображение. Перевести руку на микровинт и вращением полуоборота вперёд/назад достичь чёткого изображения препарата.

5. При переводе с малого увеличения на большое (^{^}40 или ^{^}100) необходимо:

o сменить объективы!

o под контролем зрения вращать микровинт, до появления чёткого изображения.

NB!

Чтобы не раздавить препарат и не испортить линзу микроскопа, категорически запрещается вращать макровинт, в то время, когда НЕ смотрите в окуляр!

КОНФИГУРАЦИЯ ОРГАНА НА СТЕКЛЕ

В ЗАВИСИМОСТИ ОТ ЕГО СТРОЕНИЯ

Трубчатый (полостной) орган, срезы: a – поперечный и b – продольный;

с – паренхиматозный орган, поперечные срезы.

Подпись преподавателя: _________________

Практикум

Клетка, структурная организация. Обозначьте!

1 ________________

краситель – __________

2 ________________

краситель – __________

3 ________________

Форма животных клеток. Обозначьте!

________________ ________________ ________________

____________________ ________________ ______________

Правила описания клетки:

А. Название:

• морфологическое и/или функциональное,
• стадия дифференцировки

(незрелые формы: про……бласт→ …….бласт→ про…….цит;→

зрелая форма – ……….цит)

Б. Форма.

В. Функции.

Г. Строение:

1. ЯДРО:

а) количество,

б) форма,

в) локализация: в центре или по периферии (эксцентрично) клетки;

2. ЦИТОПЛАЗМА: базофильная/ оксифильная;

3. ВКЛЮЧЕНИЯ: количество, химизм, форма (глыбки, гранулы, капли

и так далее).

Семинар №2

«Форма организации живой материи»

Препарат №1.