Произвести учёт роста возбудителя дизентерии на среде Ресселя и биохимических свойств шигелл.
Ингредиенты: Среда Ресселя, которая содержит лактозу и глюкозу и пестрый ряд Гиса, состоящий из пяти углеводов. Кроме питательной основы и углевода к среде добавлен индикатор. Исходный цвет среды розовый, при образовании кислоты цвет среды становится синим. Газообразование улавливают с помощью поплавков-коротких стеклянных трубочек, запаянных с одного конца, помещенных в питательную среду, открытым концом вниз. Образование индола и сероводорода определено с помощью индикаторных бумажек. При образовании индола индикаторная бумажка, пропитанная насыщенным раствором щавелевой кислоты, розовеет. При образования сероводорода индикаторная бумажка, пропитанная уксуснокислым свинцом, чернеет.
Постановка: Пересев колоний со среды Ресселя на ряд Гиса и МПБ и инкубация 24 часа в термостате.
Биохимические изменения на пестром ряду с посевом шигелл
Лактоза | Глюкоза | Маннит | Мальтоза | Сахароза | МПБ | |
Индол | Н2S | |||||
- (До кислоты через 2-3 дня у S.sonnei) | + До кислоты | + До кислоты | + До кислоты | - | - | - |
Таким образом, для шигелл характерна ферментация глюкозы, мальтозы и маннита с образованием кислоты, отсутствие ферментации лактозы и сахарозы, отрицательные пробы на индол и сероводород.
6. Учесть и дать заключение по реакции Видаля в диагностике брюшного тифа и паратифов А и В.
Ингредиенты реакции: исследуемая сыворотка, 4 диагностикума (О-брюшнотифозный, Н-брюшнотифозный, ОН-паратифозным А и ОН-паратифозным В), физиологический раствор.
Постановка: Учитывая, что по клинической картине нельзя отличить тиф от паратифов, реакцию ставят с четырмя диагностикумами: двумя брюшнотифозными, паратифозным А и В, готовя для каждого антигена ряд разведений исследуемой сыворотки. В рабочие разведения первого ряда внести по 2 капли О-брюшнотифозного диагностикума, в рабочие разведения второго ряда внести по 2 капли Н-брюшнотифозного диагностикума, в рабочие разведения третьего ряда внести по 2 капли ОН-паратифозного А диагностикума, а в четвертый ряд ОН-паратифозного В диагностикума. Ставят в термостат на 2 часа или до суток при комнатной температуре, после чего учитывают результат:
Учет: положительная реакция белый зонтик, отрицательная белая пуговка. Если агглютинация положительна, значит в сыворотке есть антитела, а возбудителем считается тот микроорганизм, диагностикум из которого агглютинируется антителами сыворотки больного. Диагностическим считают титр реакции 1:200.
Решение ситуационных задач.
III модуль «Кишечные инфекции»
Занятие № 3
ТЕМА: Микробиологическая диагностика холеры.
ЦЕЛЬ ЗАНЯТИЯ: знать таксономию, биологические свойства, патогенез, микробиологическую диагностику, биопрепараты для специфической профилактики и этиотропного лечения холеры
уметьдать заключение по диагностике дизентерии; распознавать возбудителей по морфологическим, культуральным, биохимическим признакам, дифференцировать биотипы холерного вибриона.
Задание на дом
1. Вопросы для самоподготовки:
1) Характеристика биологических свойств и особенности микробиологической диагностики холеры.
Холерный вибрион (Vibrio cholerae) — возбудитель холеры
1. Таксономия и классификация
Холера — особо опасная (карантинная) ОКИ, характеризующаяся поражением тонкого кишечника с нарушением водно-солевого обмена, профузной водянистой диареей и рвотой с последующим обезвоживанием организма.
Возбудителями холеры являются биологические варианты Vibrio cholerae: V.cholerae, биовар cholerae (классический), V.cholerae, биовар eltor и V.cholerae,серовар 139 (Bengal). Вид V.cholerae делят на биотипы, серогруппы и серовары. Основные биотипы — классический (V.cholerae asiaticae) и Эль — Тор (V.cholerae eltor). Серогруппы выделяют по структуре О-антигенов, в основной О1 группе холерных вибрионов выделяют серовары Огава, Инаба и Хикоджима.
Нозологические формы
Возбудитель холеры Vibrio сholerae впервые был выделен из испражнений больных и трупов погибших от холеры и изучен Р. Кохом в 1882 г. В Египте. Ф. Готшлих в 1906 г. на карантинной станции Эль-Тор (в Египте) выделил из кишечника паломников вибрион, отличающийся от вибриона Коха гемолитическими свойствами. Как впоследствии оказалось Vibrio eltor также вызывает холеру. В начале 1993 г. появились сообщения о вспышках холеры в юго-восточной Азии, вызванных вибрионами ранее неизвестной серогруппы, обозначенных как серовар О139 (Бенгал).
Холера периодически распространяется по земному шару. До 1960 года было 6 эпидемий, которые вызывал классический биовар V. cholerae, 7-я эпидемия охватила 39 стран мира, в том числе европейские. Заболевания были вызваны вибрионом Эль-Тор. Наибольшее число больных, более 170 тыс., было зарегистрировано в 1971 г. Вспышки холеры периодически регистрируются в нашей стране.
Эпидемический очаг холеры до сих пор существует в бассейнах рек Ганга и Брахмапутры в Индии, где ежегодно регистрируются несколько тысяч больных. Циркуляция возбудителя среди населения поддерживается наличием стертых форм болезни и носительством, а также сохранением вибрионов в окружающей среде.