Пример оформления тезисов

Приложение «Тезисы»

1. Работа не более 1,5 страниц формата А4 (210х2797мм) должна быть выполнена на любом из трех европейских (английском, французском или немецком) и русском языках.

2. Текст работы должен быть отпечатан по следующим параметрам: размер 12пт, одинарный межстрочный интервал, шрифт - типа Times New Roman, поля: слева-30мм, справа-15мм, снизу и сверху-20мм.

3. Заголовок печатать прописными буквами по центру страницы полужирным шрифтом(размер 12пт), точку в конце заголовка не ставить.

4. Под названием работы следует фамилия, имя авторов (полностью) по центру страницы.

5. Населенный пункт, наименование образовательного учреждения, класс, печатается сразу под фамилией автора.

Пример оформления тезисов

CONSEQUENCES OF STRAIN BACILLUS THURINGIENSIS PROTOPLAST FUSION BY ADDING INSECT BLOOD PLUSM

Malanushenko Larisa

Irkutsk, MAEI Lyceum of ISU, 10 class

Protoplast fusion is a method of effective recombination used when working with Bacillus thuringiensis since this enthomopathogenic microorganism has no advanced genetic interchange system. According to previous research protoplast genesis and its regenerating into bacillary form did not depend on lytic substance medium (L.V.Malanushenko, 2008). The effectiveness of protoplast genesis as well as regeneration statistically had no difference and was higher than in autolysis process.

The research addresses strain Bacillus thuringiensis protoplast fusion analysis.

Genetically marked strains of two subspecies B. thuringiensis: 49s9r16 ssp. dendrolimus (resistant to streptomycin and rifampycine) и 2002t16 ssp. thuringiensis (resistant to tetracycline) were used. Being in log phase cells were precipitated by centrifugation (5000 V/min; 15 min.) and resuspended in the medium for protoplasting on the basis of phosphate buffer with 7% saccharobiose. Blood plasm Vanessa urticae (20 mkl/ml, VI-aged maggots) was added and kept during 60 minutes at 370С. The protoplasts were fused in proportion 1:1, after that they were precipitated by centrifugation (5000 v/min; 15min), and 50% polyethylene glycol was added in proportion 1:4, the suspension was placed into hypertonic medium. Product selection was carried out with the use of indirect selection method, total reseeding of regenerated colonies on LB medium and their transfer to 5 types of selective medium containing tetracycline, rifampycine, streptomycin in various combinations using imprint method.

The effectiveness of protoplast genesis by adding hemolymph is 94,7% for strain 2002t16 and 95,3% for strain 49s9r16. The effectiveness of protoplast regeneration into bacillary form is lower: 2002t16– 29,7%, and 49s9r16 – 27,4%.

Chart 1

Strain Bacillus thuringiensis Protoplast Fusion Analysis

parents 49s9r16 2002t16
genotype strrrifrtets strsrifstetr
breeding By adding blood plasm By adding lysozyme
phenotype quantity phenotype quantity
  StrrRifrTets StrrRifrTets
  StrsRifsTetr StrsRifsTetr
  StrrRifsTetr StrrRifsTetr
  StrsRifrTetr StrsRifrTetr
  StrsRifsTets StrsRifsTets
  StrrRifrTetr StrrRifrTetr
         
breeding* StrrRifrTetr StrrRifrTetr
     


According to Chart 1, the proportion of hybridous forms generated under the influence of V. urticae insect blood plasm is 21,5%. Thus, the possibility to generate hybridous bacilli in insect maggots is suggestive.

АНАЛИЗ ПОСЛЕДСТВИЙ СЛИЯНИЯ ПРОТОПЛАСТОВ ШТАММОВ BACILLUS THURINGIENSIS, ПОЛУЧЕННЫХ В ПРИСУТСТВИИ ГЕМОЛИМФЫ НАСЕКОМЫХ

Маланушенко Лариса

Иркутск, МАОУ Лицей ИГУ, 10 класс

Слияние протопластов один из методов эффективной рекомбинации применяемый при работе с Bacillus thuringiensis, так как данный энтомопатогенный микроорганизм не имеет хорошо развитой системы генетического обмена. Ранее нами было показано, что получение протопластов и их регенерация в бациллярную форму не зависит от природы лизирующего вещества (Маланушенко Л.В., 2008). Как в присутствии гемолимфы, так и в присутствии лизоцима эффективность образования протопластов и их регенерации статистически не различались и были выше, чем при автолизисе.

Цель настоящей работы заключается в анализе слияния протопластов двух штаммов Bacillus thuringiensis, полученных в присутствии гемолимфы насекомых.

В исследовании использовали генетически маркированные штаммы двух подвидов B. thuringiensis: 49s9r16 ssp. dendrolimus (устойчивый к стрептомицину и рифампицину) и 2002t16 ssp. thuringiensis (устойчивый к тетрациклину). Клетки, находящиеся в логарифмической стадии роста, осаждали центрифугированием (5000 об/мин; 15 мин) ресуспензировали в среде для протопластирования на основе фосфатного буфера с 7% сахарозы. К суспензии добавляли гемолимфу Vanessa urticae (20 мкл/мл, личинки VI возраста), выдерживали в течении 60 мин при 370С. Полученные протопласты сливали в соотношении 1:1, после чего осаждали центрифугированием (5000 об/мин; 15мин), и к полученному осадку добавляли 50%-ый раствор полиэтиленгликоля в соотношении 1:4, через 5 мин суспензию высевали на гипертоническую среду. Отбор продуктов слияния протопластов проводили с помощью метода непрямой селекции, путем тотального пересева регенерировавших колоний на среду Луриа-Бертани (LB) и переноса их методом отпечатков на 5 типов селективных сред, содержащих антибиотики тетрациклин, рифампицин, стрептомицин в разных комбинациях.

Эффективность формирования протопластов при действии гемолимфы составила 94,7% для штамма 2002t16 и 95,3% для штамма 49s9r16. Эффективность регенерации протопластов в бациллярную форму была ниже и составила для штамма 2002t16– 29,7%, а для штамма 49s9r16 – 27,4%.

Таблица 1

Анализ последствий слияния протопластов двух штаммов Bacillus thurigiensis

родители 49s9r16 2002t16
генотип strrrifrtets strsrifstetr
потомство в присутствии гемолимфы в присутствии лизоцима
фенотип кол-во фенотип кол-во
  StrrRifrTets StrrRifrTets
  StrsRifsTetr StrsRifsTetr
  StrrRifsTetr StrrRifsTetr
  StrsRifrTetr StrsRifrTetr
  StrsRifsTets StrsRifsTets
  StrrRifrTetr StrrRifrTetr
         
потомство* StrrRifrTetr StrrRifrTetr
     

Из таблица1 видно, что доля гибридных форм после слияния протопластов, полученных под действием гемолимфы личинок V. urticae, составила 21,5%, что позволяет предполагать возможность образования гибридных форм бацилл в личинках насекомых.

Наши рекомендации