Перевиваемые культуры клеток.

Методика получения штаммов перевиваемых культур клеток идентична получению первичных культур, но эти штаммы способны жить и размножаться в лабораторных условиях, поэтому их поддерживают в лабораториях десятками лет. Это могут быть культуры нормальных клеток эмбриона человека или животных, опухолевые клетки, например, культуры тканей НеLа, Нер-1, Нер-2, поддерживаемые в питательных средах сложного состава.

Полуперевиваемые культуры клеток.

Принцип культивирования полуперевиваемых культур такой же как перевиваемых.

Культуры суспензированных клеток.

Растут и размножаются во взвешенном состоянии при постоянном интенсивном перемешивании среды. Используются для накопления большого количества вирусов.

Органные культуры.

Представляют собой кусочки органов животных или человека, выращиваемые вне организма и сохранившие свойственную данному органу структуру. В зависимости от свойств вируса подбирают наиболее чувствительную к данному вирусу культуру клеток на которой возможна его репродукция. О размножении вирусов в культуре клеток свидетельствуют следующие признаки:

1) цитопатический эффект (видимые под микроскопом морфологические изменения клеток, вплоть до их гибели);

2) образование в клетках включений (включения - это скопления вирусных частиц и вирусных белков в ядре и цитоплазме клеток при специальных методах окрашивания);

3) образование бляшек (участков разрушенных вирусом клеточных культур);

4) феномен гемадсорбции (способность клеточных культур, зараженных вирусом, адсорбировать на своей поверхности эритроциты);

5) цветная реакция (основана на разнице цвета индикатора питательной среды, используемой для выращивания культур клеток). Причем, при нормальном росте клеточных культур, не поврежденных вирусом, цвет питательной среды меняется за счет накопления продуктов метаболизма клеток, цвет питательной среды культур клеток поврежденных вирусом остается не измененным.

РАЗДЕЛ 3

ОСНОВЫ МЕДИЦИНСКОЙ

ПАРАЗИТОЛОГИИ

ПРАКТИЧЕСКАЯ РАБОТИА №7

Паразитические простейшие

Многие виды одноклеточных животных паразитируют в органах животных и человека. Например, лямблии, поселяясь в кишечнике, печени или желчном пузыре человека и многих диких и домашних животных, вызывают воспалительный процесс.

Большой вред людям приносит дизентерийная амёба. Её цисты попадают в организм человека, а вышедшие из цист амёбы проникают в толстую кишку, внедряются в её стенки и вызывают язвы. В кишечнике человека паразитирует крупная амёба балантидий. Это заболевание - балантидиоз, распространено в сельской местности. Заражение происходит при уходе за свиньями.

Большое клиническое значение в нашей стране имеет борьба с малярией, возбудителем которой является паразитическое простейшее малярийный плазмодий.

В настоящее время очень распространена влагалищная трихомонада, возбудитель урогениталъной инфекции.

Плазмодий малярийный

Малярия - протозойная болезнь, характеризующаяся приступами лихорадки, повторяющимися через определённые периоды. Во время приступа лихорадки у больных поднимается температура до 39-40 °С, возникают головные боли, обильное потоотделение. Окончание приступа характеризуется резким снижением температуры, слабостью, анемией, увеличением селезёнки.

Возбудитель заболевания относится к типу простейших (Рrotozoa), классу споровиков (Sporozoa), роду плазмодиев (Plazmodium).

Жизненный цикл плазмодиев проходит в организме комара (окончательный хозяин) и организме человека (промежуточный хозяин). В организме комара происходит половое размножение или спорогония, а в организме человека осуществляется стадия бесполого размножения - шизогония. Стадии размножения малярийного плазмодия проходят в печени и эритроцитах человека. Жизненный цикл развития малярийного плазмодия представлен на рисунке. Малярия обычно распознается на основании клинической картины заболевания, эпидемиологического анамнеза и обнаружения в крови паразитов малярии.

Микробиологическая диагностика проводится приготовлением мазков из крови и окрашиванием их по Романовскому - Гимзе. При микроскопии обнаруживаются различные формы возбудителя. Для диагностики и дифдиагностйки паразита также используют иммунологические и серологические методы исследования.

ротовая амёба с фагоцитированными лейкоцитами (а) и бактериями (б)

1-псевдоподии

2-ядра с пятиугольной кариосомой

Рисунок№1. Паразитирующий в кишечнике человека жгутиконосец.

1 - жгутик; 2 – ядро; 3 – присоска; 4-базальные зёрна; 5 – парабазальное тело; 6 – аксостиль.

Рисунок№2.

Трихомонада.

1 – передние жгутики; 2 – базальное тело; 3 – цитостом; 4 – ядро; 5 – аксостиль; 6 – мембрана; 7 – опорная фибрилла.

Рисунок№3.

Амёбы из кишечника человека.

А – дизентерийная амёба.

Б- кишечная амёба.

1 – ядро; 2 – фагоцитированные бактерии; 3 – фагоцитированные эритроциты.

Рисунок№4

Паразиты лейшмании

А-паразиты в клетке хозяина

Б-жгутиковые формы лейшманий в культуре.

1-лейшмании

2-ядро клетки хозяина.

Рисунок№5

Балантидий.

А- вегетативная форма

Б- циста

1-цистостом

2- цитофаринкс

3- пищеварительная вакуоль

4- сократительная вакуоль

5-макронуклеус

7- анальная пора.

А Б

Малярийный плазмодий

Жизненный цикл

1- выход спорозаетов из протока слюнной железы и внедрение их в клетки печени;

2-4 – шизогония в клетках печени;

5-9 – шизогония в эритроцитах;

9-14 – гаметогонии;

15 – женские гаметы;

16 – образование микрогамет;

17 – оплодотворение;

18 – зигота;

19 – оокинета;

20-21 – ооциста;

22 – разрыв зрелой ооцисты и выход спорозаетов;

23 – спорозаеты в слюнной железе;

24-27 – поздние тканевые стадии.

Кровяные формы малярийных плазмодиев

1- молодые кольцевидные формы 6- гамоны женские

2,3- формы зрелого возраста 7- гамоны мужские

4- делящиеся формы плазмодия

5- морулы

ПРАКТИЧЕСКАЯ РАБОТА № 8