Надписи в одну линию, разделённые косой чертой

Увеличение / Числовая апертура / Техника, CORR — Корректирующее кольцо

Конденсоры

1. Для объективов < 20x следует использовать конденсор с NA _меньше_ 0,5

2. Для больших увеличений следует использовать конденсор с NA≥ 0,5

3. При этом, предпочтительно, чтобы NA конденсора был _равен_ NA объектива

Общее увеличение микроскопа должно лежать в пределах 500-1000 значений числовой апертуры выбранного объектива.

Меньшее увеличение – не использование разрешающей способности объектива

Большее увеличение – “пустое” увеличение, без соответствующей разрешающей способности.

Окуляры

1. Вы используете объектив 60х с NA=0,9. Вам необходимо получить

максимальную детализацию объекта, избежав «пустого увеличения». Какой/какие из

окуляров Вы выберете ? (2.5х 5х 7х 10х 15х 20х 25х)

2. При тех же условиях какие окуляры следует выбрать, если бинокулярная

насадка даёт увеличение 1.5x ? (2.5х 5х 7х 10х 15х 20х 25х)

6. При настройка микроскопа по методу Кёллера прежде всего надо:

1. Закрыть все диафрагмы

2. Открыть все диафрагмы

3. Увеличить яркость осветителя

Поместить препарат и сфокусировать микроскоп

5. Отцентровать лампу

6. Сфокусировать изображение осветителя на апертуру конденсора

Освещение по Кёллеру

Сфокусируйтесь на препарате

Используйте линзу Бертранда (или выньте один

окуляр и смотрите в тубус без окуляра). Откройте

апертурную диафрагму примерно на 75-80%.

3. Сфокусируйте и отцентруйте изображение нити

накаливания на передней апертуре конденсора используя

линзу коллектора и центровку лампы (необходимо только на

некоторых микроскопах)

Закройте полевую диафрагму и, глядя через окуляры,

Сфокусируйте её изображение измением положения

Конденсора

Отцентруйте изображение полевой диафрагмы

Откройте полевую диафрагму ровно по полю зрения

7. Отрегулируйте яркость света и приступайте к

микроскопированию

Вопросы 3:

1. К чему приведёт уменьшение диаметра апертурной диафрагмы в правильно

настроенном по Кёллеру микроскопе ?

1. Увеличение разрешения

2. Уменьшение разрешения

3. Увеличение контраста

4. Уменьшение контраста

5. Уменьшению числовой апертуры системы

6. Увеличению числовой апертуры системы

7. Уменьшению глубины резкости

8. Увеличению глубины резкости

9. Уменьшению яркости

10. Увеличению яркости

11. Уменьшению аберраций

12. Увеличению аберраций

2. Что будет находиться в геометрическом фокусе объектива? Сетчатка глаза

3. К чему приведёт использование покровного стекла, не соответствующего

выбранному объективу по толщине? Сферическая аберрация

4. Вы исследуете достаточно объёмный объект (нервная клетка с отростками) и

получаемое изображение имеет слишком малую глубину фокуса. Каким способом

можно улучшить изображение. Уменьшить числовую апертуру

5. На изображении препарата видна пыль, но сам препарат чистый — назовите

плоскости в которых, при правильно настроенном микроскопе, может находится пыль.

В полевой плоскости

6. Качество наблюдаемого изображения не удовлетворительно, при просмотре

плоскости осветителя видна пыль — назовите плоскости, которые нужно проверить на

наличие пыли. Апертурная диафрагма, задняя поверхность обьектива

7. Волновая оптика

1. Длина оптического пути зависит от расстояния, которое проходит луч света

2. Длина оптического пути зависит от коэффициента преломления

3. Волны, прошедшие разный оптический путь будут всегда отличаться по фазе

8. Согласно критерию Релея 2 точечных объекта можно различить, если образуемые

ими в плоскости изображения диски Айри находятся на расстоянии:

1. Половины длины волны

2. Длины волны

3. Первого дифракционного минимума (кольца)

4. Второго дифракционного максимума (кольца)

9. Известно, что для NA конденсора >= NA объектива, размер диска Айри = λ/2NA, а

первый максимум находится на расстоянии в 1.22 диаметра диска Айри. Рассчитайте каков теоретический предел разрешающей способности микроскопа, NA объектива которого = 1.3,

NA конденсора =1.4, использующего монохроматическое освещение с длиной волны

546nm ?

1. ~0,16 mkm

2. ~0,21 mkm

3. ~0,26 mkm

4. ~0,32 mkm

10. Будет ли возможным детектировать объект, размеры которого меньше предела

разрешающей способности? Можно детектировать

11. Глубина резкости микроскопа (Z) зависит от:

1. Длины волны – чем больше длина волны, тем меньше глубина резкости

2. Длины волны – чем меньше длина волны, тем меньше глубина резкости

3. Коэффициента преломления иммерсионной жидкости (n) - чем больше n , тем

меньше глубина резкости

4. Коэффициента преломления иммерсионной жидкости (n) - чем больше n , тем

Больше глубина резкости

5. Числовой апертуры объектива – чем больше числовая апертура тем больше глубина

резкости

6. Числовой апертуры объектива – чем больше числовая апертура тем меньше глубина

Резкости

12. Вам необходимо получить максимальную разрешающую способность от

оптической системы микроскопа. Для этого Вы используете:

1. Полихроматическое освещение (белый свет)

2. Монохроматическое освещение с большой длиной волны (красное)

3. Монохроматическое освещение с малой длиной волны (синее)

4. Объектив с высоким значением числовой апертуры

5. Объектив с низким значением числовой апертуры

6. Конденсор с большим, чем у объектива, значением числовой апертуры

7. Конденсор с меньшим, чем у объектива, значением числовой апертуры

8. Конденсор со значением числовой апертуры, примерно равным значению

Числовой апертуры объектива

9. Приоткроете полевую диафрагму

10. Прикроете полевую диафрагму

11. Приоткроете апертурную диафрагму конденсора

12. Прикроете апертурную диафрагму конденсора

Вопросы 4:

1. Фазово-контрастная микроскопия отличается следующими особенностями

1. Позволяет визуализировать амплитудные объекты

2. Позволяет визуализировать фазовые объекты

3. Визуализирует разницу только в толщине фазовых объектов

4. Визуализирует разницу только в коэффициенте преломления фазовых объектов

5. Визуализирует разницу в оптическом пути

6. Требует установки поляризатора и анализатора

7. Разрешающая способность зависит от ориентации объекта

8. Имеет артефакт на границы фаз – гало

9. Не позволяет точно измерить разницу оптического пути для протяжённых объектов из-за затенения

10. Использует только D – лучи (образовавшиеся в ходе дифракции на объекте)

2. DIC микроскопия (Номарский)

1. Позволяет визуализировать амплитудные объекты

Наши рекомендации