Образование комплексных солей

а) АМПИЦИЛЛИНА ТРИГИДРАТ. 10 мг препарата растворяют в 1 мл воды и прибавляют 1-2 капли раствора железа (III) хлорида; появляется желтое окрашивание раствора.

б) БЕНЗИЛПЕНИЦИЛЛИНА КАЛИЕВАЯ, НАТРИЕВАЯ СОЛИ, ФЕНОКСИМЕТИЛПЕНИЦИЛЛИН.

5 мг препарата растворяют в нескольких каплях этанола, прибавляют 1 мл воды и 1-2 капли раствора железа (III) хлорида. Калиевая и натриевая соли бензилпенициллина образуют желтые осадки; феноксиметилпенициллин - желтовато-зеленый осадок.

Взаимодействие с реактивом Марки

(Выполняется для всех пенициллинов и цефалоспоринов).

2 мг препарата помещают в пробирку, смачивают 1 каплей воды и прибавляют 2 мл реактива Марки. Проба феноксиметилпенициллина окрашивается в красновато-коричневый цвет, цефалексина - в светло-желтый, цефалотина натриевой соли - в красный цвет. Остальные растворы остаются бесцветными. При нагревании на водяной бане темно-желтое окрашивание дают ампициллин и амоксициллин; красновато-коричневое окрашивание - соли бензилпенициллина; интенсивность окраски растворов феноксиметилпенициллин, цефалексина и цефалотина натриевой соли усиливается.

Реакция обнаружения серы

(Выполняется на примере одного из лекарственных средств из группы пенициллинов или цефалоспоринов).

К 0,01 г препарата в пробирке прибавляют 2-3 мл концентрированной кислоты азотной и кипятят в течение 2-3 минут. По охлаждении добавляют 0,5 мл раствора бария хлорида. Выпадает белый осадок.

ЧАСТНЫЕ РЕАКЦИИ ОПРЕДЕЛЕНИЯ ПОДЛИННОСТИ

ОТДЕЛЬНЫХ ЛЕКАРСТВЕННЫХ СРЕДСТВ ИЗ ГРУППЫ

БЕТА-ЛАКТАМИДОВ

БЕНЗИЛПЕНИЦИЛЛИНА НАТРИЕВАЯ И КАЛИЕВАЯ СОЛИ

Идентификация

1. Осаждение свободных кислот.

Около 20 мг препарата растворяют в 2 мл воды и по каплям прибавляют 25% раствор кислоты хлороводородной; выпадает белый осадок, растворимый в избытке кислоты.

2. Обнаружение катиона калия.

Около 20 мг бензилпенициллина калиевой соли растворяют в 2 мл воды, прибавляют 2-3 капли ледяной кислоты уксусной и 1 мл 10% раствора натрия кобальтинитрита. Образуется оранжево-желтый осадок.

БЕНЗИЛПЕНИЦИЛЛИНА НОВОКАИНОВАЯ СОЛЬ

Идентификация

Реакция образования азокрасителя (обнаружение новокаина) Около 10 мг препарата растворяют в 2 мл воды, прибавляют 0,5 мл разведенной кислоты хлороводородной, 0,5 мл 0,1 М раствора натрия нитрита. Полученный раствор хорошо перемешивают и прибавляют к 1 мл щелочного раствора бета-нафтола. Появляется вишнево-красное окрашивание.

БИЦИЛЛИН-1 (БЕНЗАТИН-БЕНЗИЛПЕНИЦИЛЛИН)

Идентификация

1. Обнаружение N,N-дибензилэтилендиамина. К 0,1 г препарата прибавляют 2 мл 1 М раствора натрия гидроксида, взбалтывают в течение 2 минут. Полученную смесь экстрагируют дважды эфиром по 3 мл. Эфирное извлечение высушивают, сухой остаток растворяют в 1 мл 50% спирта, добавляют 5 мл раствора кислоты пикриновой. Нагревают при 90 °С 5 минут и оставляют медленно охлаждаться; выпадают желтые кристаллы.

2. Реакция окислительного разложения. 10 мг препарата растворяют в 1 мл раствора натрия гидроксида, прибавляют 3 мл воды и 1 мл 1% раствора калия перманганата; раствор окрашивается в зеленый цвет. При нагревании ощущается запах бензальдегида.

АМПИЦИЛЛИНА ТРИГИДРАТ

Идентификация

1. Взаимодействие с реактивом Фелинга.

Около 10 мг препарата растворяют в 1 мл воды и прибавляют 2 мл реактива Фелинга и 6 мл воды; появляется красно-фиолетовое окрашивание.

2. Взаимодействие с нингидрином.

Около 20 мг препарата растворяют в 2 мл воды, прибавляют 2 мл свежеприготовленного 0,25% раствора нингидрина и кипятят в течение 2-3 минут. Появляется вишневое окрашивание.

КАРБЕНИЦИЛЛИНА ДИНАТРИЕВАЯ СОЛЬ

Идентификация

Реакция декарбоксилирования

Около 0,1 г препарата нагревают в закрытой пробирке на водяной бане в течение 3 минут. Затем прибавляют 1-2 капли раствора, полученного смешиванием 1 мл 0,5% раствора натрия карбоната, 1 мл раствора фенолфталеина и 10 мл воды; наблюдают исчезновение окраски реактива.

ЦЕФАЛЕКСИН

Идентификация

1. Реакция комплексообразования.

Около 20 мг препарата смешивают с 0,25 мл 1% раствора ледяной кислоты уксусной, прибавляют 0,1 мл 1% раствора меди сульфата и 0,1 мл 2 М раствора натрия гидроксида. Появляется оливково-зеленое окрашивание.

2. Реакция окисления.

Около 20 мг препарата смешивают с 0,25 мл 80% кислоты серной, содержащей 1% кислоты азотной; появляется желтое окрашивание.

ЦЕФАЛОТИНА НАТРИЕВАЯ СОЛЬ

Идентификация

Реакция окисления

Около 20 мг препарата смешивают с 0,15 мл 80% кислоты серной, содержащей 1% кислоты азотной; появляется оливково-зеленое окрашивание, переходящее в красновато-коричневое.

КОЛИЧЕСТВЕННОЕ ОПРЕДЕЛЕНИЕ СУММЫ ПЕНИЦИЛЛИНОВ

(Выполняется для бензилпенициллина натриевой или калиевой соли).

0,06-0,08 г препарата (точная навеска) растворяют в воде в мерной колбе вместимостью 100 мл, доводят объем раствора водой до метки и перемешивают.

5 мл полученного раствора переносят в колбу с притертой пробкой вместимостью 250 мл, прибавляют 2 мл 1 н. раствора натрия гидроксида и оставляют на 20 минут.

После этого к смеси прибавляют 2 мл 1 н раствора кислоты хлороводородной, 5 мл 0,3 М раствора ацетатного буфера (рН 4,50± 0,05), 20 мл 0,01 н. раствора йода и оставляют на 20 минут в темном месте.

Избыток йода оттитровывают 0,01 н раствором натрия тиосульфата до слабо-желтого окрашивания, затем прибавляют раствор крахмала и титруют до обесцвечивания.

В контрольную колбу переносят 5 мл раствора пенициллина, прибавляют 5 мл 0,3 М раствора ацетатного буфера, 20 мл 0,01 н. раствора йода, оставляют на 20 минут в темном месте, после чего избыток йода оттитровывают 0,01 н. раствором натрия тиосульфата, как описано выше.

Разность в объемах затраченных титрованных растворов соответствует содержанию суммы пенициллинов в препарате.

Содержание (%) суммы пенициллинов в препарате рассчитывают по формуле:

где

V₁ - объем 0,01 н. раствора натрия тиосульфата в контрольном титровании;

V₂ - объем 0,01 н раствора натрия тиосульфата в опытном титровании;

К- коэффициент поправки 0,01 н. раствора натрия тиосульфата;

С - коэффициент пересчета стандартного образца натриевой соли бензилпенициллина на исследуемый пенициллин. Для бензилпенициллина калиевой соли он равен 1,045; для бензилпенициллина натриевой соли - 1,000.

Э - величина эквивалента или масса стандартного образца натриевой соли бензилпенициллина, соответствующая 1 мл титранта (см. табл.);

а - навеска препарата, г;

100/5 - разведение.

Содержание суммы пенициллинов в бензилпенициллине натриевой или калиевой соли должно быть не менее 96%.

ТЕМА 1: ОПРЕДЕЛЕНИЕ КАЧЕСТВА ЛЕКАРСТВЕННЫХ СРЕДСТВ ГРУППЫ ТЕРПЕНОВ

Вопросы для самоконтроля:

1. Напишите структурные формулы, латинские и рациональные названия ментола, валидола, терпингидрата, камфоры, кислоты сульфокамфорной, сульфокамфокаина и ретинола ацетата. Укажите функциональные группы в составе их молекул.

2. Опишите физические свойства изучаемых препаратов (агрегатное состояние, цвет, запах, растворимость в воде и органических растворителях).

3. Опишите реакции идентификации (реактивы, условия и эффект реакции) перечисленных выше лекарственных средств. Напишите соответствующие уравнения химических реакций.

4. Назовите специфические примеси в ментоле, камфоре и ретинола ацетате.

5. Перечислите физические константы, используемые для подтверждения подлинности и чистоты ментола, валидола, терпингидрата, камфоры, бромкамфоры, кислоты сульфокамфорной, сульфокамфокаина и ретинола ацетата.

6. Назовите методы количественного определения изучаемых лекарственных средств из группы терпенов. Напишите соответствующие уравнения химических реакций.

7. Охарактеризуйте стабильность, опишите условия хранения, медицинское применение и пути метаболизма исследуемых препаратов.

МЕНТОЛ

Идентификация

0,01 препарата растворяют в 1 мл концентрированной кислоты серной и прибавляют 1 мл 1% раствора п-диметиламинобензальдегида в концентрированной серной кислоте, появляется красное окрашивание, которое исчезает при добавлении 1 мл воды.

Количественное определение

К 0,5 мл анализируемого раствора прибавляют 9,5 мл этанол; перемешивают (раствор А). К 0,5 мл раствора А прибавляют 9,5 мл этан (раствор Б).

В пробирку отмеривают 3 мл свежеприготовленного 1% раствора п-диметиламинобензальдегида в концентрированной кислоте серной и осторожно по стенке пробирки прибавляют 1 мл раствора Б. Жидкость тщательно перемешивают и через 20 минут измеряют оптическую плотность при длине волны 545 нм кювете с толщиной слоя 5 мм.

Раствором сравнения служит смесь из 1 мл этанола и 3 мл 1% раствора п-диметиламинобензальдегида в концентрированной кислоте серной.

Содержание ментола в препарате в % рассчитывают по формуле:

где

D - оптическая плотность испытуемого раствора;

W - разведение;

а - количество препарата в мл, взятое для анализа;

- удельный показатель поглощения, равный 555 для ментола натурального, 497- для ментола рацемического.

ТЕРПИНГИДРАТ

Идентификация

1. К 5 мл 2% горячего раствора препарата прибавляют несколько капель концентрированной кислоты серной; жидкость мутнеет и приобретает ароматный запах терпинеола.

2. К 10 мг препарата прибавляют 5 капель 3% спиртового раствора железа (III) хлорида и осторожно выпаривают в фарфоровой чашке досуха; одновременно в различных частях чашки появляется карминово-красное, фиолетовое и зеленое окрашивание. От прибавления к охлажденному остатку бензола, последний окрашивается в синий цвет.

ВАЛИДОЛ

Идентификация

К нескольким каплям раствора прибавляют 1 мл 1% раствора п-диметиламинобензальдегида в концентрированной кислоте серной; появляется красно-оранжевое окрашивание, исчезающее при прибавлении воды.

КАМФОРА

Идентификация

К 0,01 г препарата прибавляют 1 мл концентрированной кислоты серной и 1 мл 1% раствора п-диметиламинобензальдегида в кислоте серной концентрированной - появляется красное окрашивание, исчезающее при добавлении воды. Определение температуры плавления.

Вещество помещают в капилляр, имеющий диаметр от 0,9 до 1 мм и толщину стенки от 0,1 до 0,15 мм, запаянный с одного конца. Его заполняют так, чтобы после уплотнения вещество имело высоту слоя около 3 мм.

Слой уплотняют капиллярной палочкой или многократным пропусканием в вертикально поставленную стеклянную трубку высотой не менее 50 см. Нагревание проводят сначала быстро, за десять градусов до ожидаемого начала плавления капиллярную трубку с веществом вносят в прибор. Для этого быстро вынимают термометр, прикрепляют к нему капиллярную трубку с помощью резинового колечка или тонкой проволоки и снова вносят в прибор. Запаянный конец капилляра должен находиться на уровне середины ртутного шарика термометра. Продолжают нагревание со скоростью 1,5 - 2°С в минуту.

Для испытуемого лекарственного препарата необходимо провести не менее двух параллельных определений. Расхождения между результатами не должны отличаться более чем на один градус.

Температура плавления камфоры должна находиться в пределах 174-180°С (без предварительного высушивания).

БРОМКАМФОРА

Идентификация

0,1 г препарата растворяют в 3 мл спирта, прибавляют 1 мл раствора натрия гидроксида и 0,3 г цинковой пыли. Смесь кипятят в течение 1-2 мин. и после охлаждения фильтруют. К 1 мл фильтрата прибавляют 1 мл разведенной кислоты хлороводородной, 0,5 мл хлорамина, 1 мл хлороформа и взбалтывают. Хлороформный слой окрашивается в желто-бурый цвет.

МАСЛЯНЫЙ РАСТВОР РЕТИНОЛА АЦЕТАТА (3,44%; 6,88%; 8,60%)

Идентификация

1. К нескольким каплям масляного раствора ретинола ацетата прибавляют 1 мл хлороформа и 5 мл раствора хлорида сурьмы (III); появляется нестойкое синее окрашивание.

2. К 2 мл концентрированной кислоты серной прибавляют 1 каплю раствора ретинола ацетата; появляется интенсивное пурпурное окрашивание, через несколько минут переходящее в винно-красное.

3. 1 каплю раствора ретинола ацетата смешивают с 5 мл хлороформа, добавляют 0,5 мл уксусного ангидрида и 2 капли кислоты серкой концентрированной, перемешивают. Желтоватая окраска раствора переходит в тёмно-синюю.

Количественное определение.

Около 0,1 г препарата (точная навеска) растворяют в этаноле в мерной колбе на 100 мл, доводят объем раствора тем же спиртом до метки. К 1 мл полученного раствора прибавляют 9 мл спирта. Измеряют оптическую плотность полученного раствора на спектрофотометре при длине волны 326 нм в кювете с толщиной слоя 1 см на фоне этанола

Содержание ретинола ацетата в 1 мл раствора в граммах вычисляют по формуле:

где

D - оптическая плотность;

100 - разведение;

d - плотность препарата (для 3,44% раствора 0,8823);

1550 – удельный показатель поглощения для 100% раствора ретинола ацетата в абсолютном спирте.

а – навеска препарата, г.

Содержание ретинола ацетата в 1 мл препарата соответственно должно быть: 0,0310 - 0,0378 г (90 000 - 110 000 ME), 0,0619 - 0,0757 г (180 000 - 220 000 ME), 0,0774 - 0,0946 г (225 000 - 275 000 ME).

РАСТВОР СУЛЬФОКАМФОКАИНА 10% ДЛЯ ИНЪЕКЦИЙ

Идентификация

1. К 0,5 мл раствора препарата прибавляют 0,25 мл 1 н раствора натрия гидроксида; выделяется бесцветный маслянистый осадок. Прибавляют 5 мл воды и полученную смесь переносят в делительную воронку и извлекают 10 мл хлороформа. После расслоения хлороформное извлечение фильтруют через сухой фильтр, содержащий безводный натрия сульфат. Хлороформ отгоняют, остаток растворяют в 2 мл 0,1 н кислоты хлороводородной, прибавляют 3 капли 0,1 М раствора натрия нитрита и взбалтывают. Полученный раствор прибавляют к 3 мл щелочного раствора β-нафтола; появляется вишнево-красное окрашивание или образуется оранжево-красный осадок.

2. 0,5 мл препарата помещают в выпарительную чашку, прибавляют около 10 мг натрия нитрита и 0,25 г натрия карбоната. Смесь выпаривают на водяной бане досуха, прокаливают. После охлаждения к остатку прибавляют концентрированную кислоту хлороводородную до конца вспенивания и выпаривают досуха. К остатку прибавляют 5 мл воды и отфильтровывают нерастворившуюся часть.

К раствору прибавляют 0,5 мл концентрированной кислоты хлороводородной и нагревают. К кипящему раствору прибавляют 0,5 мл горячего 5% раствора бария хлорида; образуется белый осадок (сульфогруппа).

Количественное определение

Новокаин.К 0,5 мл сульфокамфокаина прибавляют 1 мл разведенной кислоты хлороводородной и воды дистиллированной до общего объема 8 мл. Прибавляют 0,1 г калия бромида и при постоянном перемешивании титруют 0,05 М раствором натрия нитрита (индикатор тропеолин 00 в смеси с метиленовым синим) до перехода красно-фиолетового окрашивания в голубое.

Параллельно проводят контрольный опыт.

1 мл 0,05 М раствора натрия нитрита соответствует 0,01182 г новокаина-основания, которого в 1 мл препарата должно быть 0,0479 - 0,0529 г.

Кислота сульфокамфорная. К 0,5 мл препарата прибавляют 1 мл воды очищенной и смесь из 4 мл спирта и 2 мл хлороформа, предварительно нейтрализованную по фенолфталеину. Титруют при слабом взбалтывании 0,05 н. раствором натрия гидроксида до слабо-розового окрашивания водного слоя.

В конце титрования при расслоении смеси прибавляют еще 1 каплю индикатора.

1 мл 0,05 н раствора натрия гидроксида соответствует 0,011615 г кислоты сульфокамфорной, которой в 1 мл препарата должно быть 0,0471 - 0,0521 г.

ТЕМА 2: ОПРЕДЕЛЕНИЕ КАЧЕСТВА ЛЕКАРСТВЕННЫХ СРЕДСТВ,

ПРОИЗВОДНЫХ ЦИКЛОПЕНТАНОПЕРГИДРОФЕНАНТРЕНА: